Anticorpo policlonal de coelho anti-GSPT1 para WB, ELISA - P15170

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da GSPT1

• Também conhecida como ERF3A (subunidade de ligação ao GTP do fator de liberação da cadeia peptídica eucariótica ERF3A) e homóloga da proteína 1 da transição da fase G1 para S, a GSPT1 é codificada pelo gene GSPT1 (ID do gene: 2935).
• A GSPT1 é o componente GTPase do complexo ternário eRF1-eRF3-GTP, que medeia a terminação da tradução nos códons de parada UAA, UAG e UGA ao entregar eRF1 ao sítio A do ribossomo. Referências relacionadas: PMID:15987998, PMID:19417105, PMID:2511002, PMID:27863242, PMID:16777602
• No decaimento de mRNA mediado por mutação sem sentido (NMD), a GSPT1 é um componente do complexo SURF transitório, que recruta UPF1 para ribossomos paralisados, direcionando os mRNAs com códons de parada prematuros para degradação. Referências relacionadas: PMID:24486019
• É necessária para a terminação da tradução mediada por SHFL, que inibe a mudança programada do quadro de leitura ribossomal (-1PRF) de mRNAs virais e celulares, destacando um papel na defesa antiviral. Referências relacionadas: PMID:30682371
• Classificada pelas palavras-chave do UniProt como proteína de ligação ao GTP, hidrolase e proteína de ligação a nucleotídeos; também identificada no proteoma de referência e sujeita a splicing alternativo.
• O UniProt indica um peso molecular de aproximadamente 56 kDa para a isoforma canônica, consistente com a banda de 56 kDa observada na análise por western blot.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 138–420 da GSPT1 humana, uma região que engloba o domínio de ligação ao GTP; esse desenho pode favorecer o reconhecimento da proteína nativa e contribuir para a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato.
• Para western blot (WB), considere que o peso molecular previsto é de aproximadamente 56 kDa; use porcentagens de gel e controles de carregamento apropriados para confirmar a especificidade no seu tipo de amostra.
• Os protocolos de ELISA podem exigir a otimização do antígeno de revestimento e da titulação do anticorpo; inclua um controle positivo conhecido (por exemplo, proteína GSPT1 recombinante) para validar o desempenho do ensaio.
• Como a GSPT1 é evolutivamente conservada, espera-se reatividade cruzada entre humano, camundongo e rato, mas recomendamos verificar a reatividade no seu sistema-modelo com anticorpos secundários apropriados e compatíveis com a espécie.

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