Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-GTPBP4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9BZE4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GTPBP4

• GTPBP4, também conhecida como Proteína 1 ligante a GTP nucleolar (NOG1), proteína do gene de insuficiência renal crônica (CRFG) e proteína ligante a GTP NGB, é um membro da família das proteínas ligantes a GTP.
• Atua como GTPase na biogênese da subunidade ribossomal 60S, sendo essencial para a montagem de ribossomos e a tradução (PubMed:32669547). Referências relacionadas: PMID:32669547
• Atua como repressor da proteína tumoral TP53, impedindo sua estabilização e inibindo, dessa forma, a parada do ciclo celular (PubMed:20308539). Referências relacionadas: PMID:20308539
• Localiza-se predominantemente no nucléolo, o local da biogênese ribossomal.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e formação de ligação isopeptídica (conjugação com ubiquitina), que podem regular sua atividade e estabilidade.
• A proteína contém domínios de ligação a GTP e a nucleotídeos, classificando-a como GTPase nucleolar.
• O splicing alternativo do gene GTPBP4 produz múltiplas isoformas, embora as funções específicas das isoformas não estejam totalmente caracterizadas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante correspondente aos aminoácidos 385-634 da GTPBP4 humana, cobrindo a região C-terminal. Essa região compartilha homologia com camundongo e rato, o que provavelmente contribui para a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de 74 kDa; utilize uma porcentagem de gel adequada e controles de carga. Valide o anticorpo com um lisado de controle positivo.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), considere otimizar os métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) e inclua um controle sem anticorpo primário para avaliar a coloração de fundo.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), como a GTPBP4 é nucleolar, recomenda-se a permeabilização com detergentes como o Triton X-100 para acessar o compartimento nuclear. Confirme a localização com um marcador nuclear.
• ELISA e outros imunoensaios podem exigir titulação do anticorpo e tampões de bloqueio otimizados para anticorpos policlonais para reduzir a ligação não específica.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato deve ser confirmada no tecido ou linha celular relevante, com controles positivos e negativos específicos de cada espécie.

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