Anticorpo Policlonal Anti-GUCY2D para WB e ELISA - Q02846

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GUCY2D

• A GUCY2D, também conhecida como guanilato ciclase 1 da retina (ROS-GC, GC-E), é uma enzima ligada à membrana codificada pelo gene GUCY2D em humanos. Seus múltiplos aliases associados a doenças incluem LCA1, CORD6 e CSNB1I.
• A GUCY2D catalisa a conversão de GTP em cGMP, um segundo mensageiro chave nas células fotorreceptoras, reabastecendo os níveis de cGMP que são esgotados durante a fototransdução em bastonetes e cones. Esta atividade é crítica para a transdução do sinal visual (PubMed:15123990, PubMed:21928830, PubMed:26100624). Referências relacionadas: PMID:15123990 PMID:21928830 PMID:26100624
• Evidências sugerem que a GUCY2D também pode estar envolvida no tráfego de proteínas associadas à membrana para a membrana do segmento externo do fotorreceptor (Por similaridade).
• A proteína localiza-se principalmente na membrana do segmento externo do fotorreceptor e na membrana do retículo endoplasmático, consistente com seu papel na transdução sensorial e no processamento de proteínas.
• A GUCY2D é uma glicoproteína que contém múltiplas hélices transmembrana, uma ligação dissulfeto e um peptídeo sinal, característicos de sua integração na membrana e processamento na via secretora.
• Mutações na GUCY2D estão associadas a várias distrofias retinianas hereditárias, incluindo amaurose congênita de Leber (LCA1), distrofia de cones e bastonetes (CORD6) e cegueira noturna estacionária congênita, sublinhando seu papel essencial na visão.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Design do imunógeno: O imunógeno da proteína de fusão recombinante corresponde à região N-terminal (aa 52-350) da GUCY2D humana, que pode visar o domínio extracelular/luminal. Este design racional garante a especificidade do anticorpo, evitando regiões transmembrana altamente hidrofóbicas.
• Western blot (WB): Espera-se uma banda em torno de 120 kDa com base no peso molecular calculado de ~120 kDa. Devido à glicosilação e outras modificações, a migração real pode variar. Use controles adequados e valide em amostras derivadas de retina ou fotorreceptores.
• ELISA: O anticorpo é adequado para ELISA. Considere o formato de ELISA indireto e valide usando proteína recombinante ou lisados celulares que expressem GUCY2D. A reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato pode ser vantajosa para estudos translacionais.
• Preparação da amostra: Para proteínas de membrana como a GUCY2D, garanta a solubilização adequada com detergentes apropriados e evite ferver as amostras para prevenir a agregação. Otimize as condições de desnaturação para sua configuração experimental específica.

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