Anticorpo monoclonal de coelho anti-GZMA para WB, IP, IF/ICC, ELISA - P12544

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Granzyma A

• A Granzyma A (GZMA), também conhecida como triptase de CTL, fragmentina-1 e fator de Hanukkah (HF), é uma serina protease abundantemente expressa nos grânulos citosólicos de células T citotóxicas e células NK.
• Após ser introduzida nas células-alvo por meio da sinapse imunológica, a GZMA desencadeia piroptose independente de caspases ao clivar a gasdermina-B (GSDMB), liberando seu domínio formador de poros e induzindo a lise das células-alvo (PubMed:32299851, PubMed:34022140, PubMed:36157507).
  Referências relacionadas:
  PMID:32299851 PMID:34022140 PMID:36157507
• Ela cliva após resíduos de Lys ou Arg (PubMed:12819770, PubMed:32299851).
  Referências relacionadas:
  PMID:12819770 PMID:32299851
• Entre os substratos adicionais estão a enzima de reparo oxidativo APEX1, clivada em Lys-31 (PubMed:12524539), e a proteína de montagem de nucleossomos SET, clivada em Lys-189 para promover a degradação do DNA (PubMed:11555662, PubMed:12628186, PubMed:16818237).
  Referências relacionadas:
  APEX1: PMID:12524539
  SET: PMID:11555662 PMID:12628186 PMID:16818237
• A GZMA localiza-se nos grânulos citoplasmáticos e é secretada na sinapse imunológica após o reconhecimento da célula-alvo.
• A proteína é uma glicoproteína que contém pontes dissulfeto e é inicialmente sintetizada como um zimogênio inativo que requer processamento proteolítico para ser ativado.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para western blotting, espere uma banda de aproximadamente 29 kDa em condições redutoras; valide em linhagens celulares humanas relevantes, como células T citotóxicas ou células NK.
• Ao realizar imunofluorescência ou imunocitoquímica, considere a permeabilização para visualizar a marcação citoplasmática granular.
• Para imunoprecipitação e ELISA, otimize a diluição do anticorpo na matriz específica da sua amostra.
• Garanta controles positivos e negativos apropriados, por exemplo, linhagens celulares que expressam GZMA e linhagens knockout, para confirmar a especificidade.

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