Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-GZMA para WB, IF/ICC, ELISA - P12544

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Granzima A

• A granzima A, também conhecida como triptase de CTL, fragmentina-1, fator de Hanukkah (HF) e codificada pelo gene GZMA (CTLA3, HFSP), é uma serina protease abundante encontrada nos grânulos citoplasmáticos de células T citotóxicas e células natural killer (NK).
• Ela induz piroptose independente de caspase nas células-alvo após ser entregue através da sinapse imunológica, clivando após resíduos de Lys ou Arg. Referências relacionadas: PMID:12819770, PMID:32299851, PMID:3257574
• Uma vez dentro da célula-alvo, o GZMA cliva a gasdermina-B (GSDMB), liberando sua porção formadora de poros para desencadear a piroptose e a morte celular. Referências relacionadas: PMID:32299851, PMID:34022140, PMID:36157507
• Também cliva a APEX1 após Lys-31, destruindo sua atividade de reparo oxidativo. Referências relacionadas: PMID:12524539
• O GZMA cliva a proteína de montagem de nucleossomo SET após Lys-189, interrompendo a montagem do nucleossomo e permitindo que o complexo SET migre para o núcleo para fazer cortes e degradar o DNA. Referências relacionadas: PMID:11555662, PMID:12628186, PMID:16818237
• Em nível subcelular, a granzima A está localizada nos grânulos citoplasmáticos e é secretada upon desgranulação.
• Como uma glicoproteína ligada por dissulfeto, é inicialmente produzida como um zimogênio e é uma serina protease bem caracterizada com estruturas 3D disponíveis.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 29 kDa; valide a detecção usando lisados de controle positivo de células T citotóxicas ativadas ou linhagens de células NK.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, é necessária a permeabilização para detectar o GZMA citoplasmático granular. A coloração simultânea com perforina ou CD8 pode confirmar a especificidade das células citotóxicas.
• Ao realizar ELISA, considere o uso de GZMA humano recombinante como padrão e verifique a linearidade na matriz de amostras relevante.
• Este anticorpo mostra reatividade cruzada com o GZMA de camundongo e rato, mas o alinhamento da sequência da região do imunógeno é aconselhado se forem necessárias comparações interespecíficas quantitativas.

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