Anticorpo policlonal de coelho anti-HASPIN para WB, ELISA - Q8TF76

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da HASPIN

• Proteína-quinase de serina/treonina que catalisa a fosforilação da histona H3 na treonina-3 (H3T3ph) durante a mitose. Essa modificação é crítica para o posicionamento e a ativação corretos do complexo passageiro cromossômico (CPC) nos centrômeros, garantindo assim a coesão adequada das cromátides, o alinhamento dos cromossomos na metáfase e a progressão normal do ciclo celular. Referências relacionadas:
• A proteína é fortemente expressa nos testículos, timo e medula óssea, com níveis mais baixos na próstata, intestino, pulmões, baço e linfonodos. Também é detectada na pele, fígado, rins e intestino delgado fetais, e é encontrada em linhagens celulares proliferativas, mas não em linhagens não proliferativas, sugerindo um papel na divisão celular.
• A HASPIN localiza-se no núcleo, nos cromossomos, no citoplasma e nos microtúbulos do fuso, indicando uma distribuição subcelular dinâmica durante as fases do ciclo celular.
• Pertence à superfamília das proteínas-quinases e contém um domínio quinase atípico; requer magnésio e ATP para sua atividade, conforme indicado por suas propriedades de ligação ao ATP e a nucleotídeos.
• Sujeita-se a splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas. O proteoma de referência identifica-a como uma fosfoproteína, sugerindo ainda uma regulação por modificações pós-traducionais.
• Também conhecida como proteína 2 específica de células germinativas (GSG2) e proteína-quinase nuclear específica de células germinativas haploides, refletindo sua identificação inicial em células germinativas, embora suas funções se estendam à mitose de células somáticas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 290-470 da HASPIN humana. Essa região está localizada dentro do domínio quinase, que é bem conservado, contribuindo potencialmente para a reatividade cruzada observada com camundongo.
• Para Western blotting, considere que o peso molecular previsto é de aproximadamente 88 kDa. Valide utilizando controles positivos adequados, como testículo ou linhagens celulares proliferativas.
• No ELISA, utilize HASPIN recombinante ou antígenos peptídicos para confirmar a reatividade. Devido à sua natureza policlonal, o anticorpo pode reconhecer múltiplos epítopos; recomenda-se realizar uma titulação.
• Como a HASPIN é regulada pelo ciclo celular, o momento da coleta e a sincronização das amostras podem ser críticos para a detecção. Investigue a expressão em células mitoticamente ativas.

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