Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-HB-EGF para WB, IF/ICC, ELISA - Q99075

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HB-EGF

• HB-EGF, também conhecido como DTR (receptor da toxina diftérica), é um membro da família do fator de crescimento epidérmico (EGF). É sintetizado como um precursor transmembrana do tipo I (proHB-EGF) que subsequentemente é clivado para liberar um fator de crescimento solúvel contendo o domínio semelhante ao EGF.
• A forma solúvel do HB-EGF atua como um ligante potente para EGFR, ERBB2 e ERBB4, com maior afinidade pelo EGFR do que o próprio EGF, e funciona como um mitógeno potente para células do músculo liso e fibroblastos, mas não para células endoteliais.
• O HB-EGF é essencial para a formação normal das válvulas cardíacas e para a função cardíaca, e promove a proliferação de células do músculo liso, destacando seu papel no desenvolvimento cardiovascular e em doenças cardiovasculares.
• Além da sua atividade de fator de crescimento, o proHB-EGF transmembrana funciona como o receptor da toxina diftérica, mediando sua entrada nas células.
• Subcelularmente, o proHB-EGF se localiza na membrana celular como uma proteína transmembrana de passagem única, enquanto a forma solúvel clivada é secretada para o espaço extracelular, permitindo a sinalização justacrina e paracrina.
• De acordo com o UniProt, o HB-EGF é caracterizado por um domínio semelhante ao EGF, motivos de ligação à heparina e múltiplas pontes dissulfeto, e passa por processamento proteolítico para gerar o fator de crescimento maduro.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 20-160 do HB-EGF humano, cobrindo grande parte do domínio extracelular. Este design tem como alvo o fator de crescimento solúvel e o precursor, permitindo a detecção de ambas as formas nas aplicações relevantes.
• Para Western blot, pode ser observada uma banda em torno de 23 kDa, consistente com o peso molecular previsto do precursor de comprimento completo. Bandas adicionais correspondentes a formas processadas também podem aparecer dependendo da amostra.
• Em imunofluorescência/ICC, podem ser observados padrões de coloração de membrana e/ou citoplasmáticos, refletindo o precursor e potencialmente formas internalizadas ou secretadas. Controles adequados e métodos de fixação/permeabilização devem ser validados.
• Para ELISA, considere emparelhar este anticorpo com um anticorpo de detecção compatível ou realizar titulação padrão para otimizar a sensibilidade e especificidade para o analito alvo.
• A reatividade cruzada com o HB-EGF de camundongo e rato é relatada; no entanto, as condições experimentais devem ser validadas para cada espécie e aplicação, pois a reatividade pode variar.

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