Anticorpo Policloal de Coelho Anti-HCFC1 para WB, ELISA - P51610

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HCFC1

• A HCFC1 é um coregulador transcricional que atua como proteína de suporte, mediando interações entre fatores de transcrição como THAP11 e ZNF143 e outros coreguladores (PubMed:26416877). Referências relacionadas: PMID:26416877
• É fundamental para a progressão do ciclo celular, com papéis funcionais na transição G1/S, comprovado por estudos com mutantes e modelos de knockdown (PubMed:10629049, PubMed:10779346, PubMed:15190068). Referências relacionadas: PMID:10629049 PMID:10779346 PMID:15190068
• A HCFC1 liga os complexos Set1/Ash2 de metiltransferase da histona H3K4 e Sin3 de desacetilase de histonas, integrando a ativação e repressão transcricional (PubMed:12670868). Referências relacionadas: PMID:12670868
• Atua como coativador para EGR2 e GABP2 e reprime a ativação mediada por ZBTB17 do promotor p15(INK4b), inibindo o recrutamento de p300 (PubMed:12244100, PubMed:14532282). Referências relacionadas: PMID:12244100 PMID:14532282
• Como parte do complexo NSL, a HCFC1 provavelmente contribui para a acetilação da histona H4 nucleossômica em resíduos específicos de lisina (PubMed:20018852). Referências relacionadas: PMID:20018852
• A HCFC1 recruta KMT2E/MLL5 para promotores responsivos a E2F1, promovendo a ativação transcricional e facilitando a transição da fase G1 para S (PubMed:23629655). Referências relacionadas: PMID:23629655
• A localização subcelular inclui tanto o citoplasma quanto o núcleo, o que é consistente com seus diversos papéis regulatórios.
• A proteína é amplamente expressa, com níveis particularmente altos em tecidos fetais e rim adulto, e está envolvida em interações hospedeiro-vírus, notavelmente com a proteína VP16 do vírus herpes simplex.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos 250 aminoácidos N-terminais da HCFC1 humana. Ao usar este anticorpo policlonal, o reconhecimento de múltiplos epítopos pode gerar um sinal robusto, mas a consistência entre lotes deve ser confirmada para ensaios críticos.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de ~209 kDa. Use um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (ex.: 6-8%) e garanta uma transferência eficiente por transferência úmida com tempo de transferência estendido. Recomenda-se a inclusão de um marcador de peso molecular alto.
• Devido ao alto peso molecular, considere usar lisados de proteínas frescos com inibidores de protease para evitar degradação, e verifique a expressão no seu tecido alvo; lisados de rim e tecido fetal podem servir como controles positivos.
• De acordo com dados do fornecedor, o anticorpo apresenta reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato. No entanto, recomenda-se o alinhamento da sequência da região do imunógeno entre as espécies para garantir a reatividade esperada. Realize a validação com controles apropriados.
• Para aplicações em ELISA, otimize a concentração do antígeno de revestimento e do anticorpo; considere possíveis problemas de alto sinal de fundo devido à natureza policlonal.

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