Anticorpo Policlonal Anti-HCoV-HKU1 Spike S1 para WB, ELISA - Q5MQD0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Spike S1 do HCoV-HKU1

• A glicoproteína Spike (S), também conhecida como E2 ou proteína peplômera, é a principal proteína do envelope do HCoV-HKU1 responsável pela adesão e entrada na célula hospedeira.
• A proteína S é clivada em subunidades S1 e S2; a subunidade S1 contém o domínio de ligação ao receptor (RBD) que interage com os receptores do hospedeiro para iniciar a infecção.
• Após a ligação ao receptor, a subunidade S2 sofre mudanças conformacionais, expondo o peptídeo de fusão e mediando a fusão das membranas virais e celulares como uma proteína de fusão de classe I.
• Regiões de repetição de heptadas em S2 se montam em uma estrutura de trímero de grampos, aproximando o peptídeo de fusão da membrana alvo, o que impulsiona a aproximação e fusão das membranas.
• O peptídeo de fusão é desmascarado após a clivagem de S2, que ocorre na endocitose viral, facilitando a entrada do vírus no citoplasma do hospedeiro.
• A localização subcelular inclui a membrana do vírion, a membrana da célula hospedeira e a membrana do compartimento intermediário entre o retículo endoplasmático e o complexo de Golgi da célula hospedeira.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais importantes, incluindo formação de pontes dissulfeto, glicosilação e palmitoilção (lipoproteína), que são críticas para sua integridade estrutural e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• No western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 152 kDa correspondente à proteína Spike de comprimento total; condições redutoras podem ser necessárias para detecção ideal.
• Para confirmar a especificidade, considere usar lisados de células infectadas com HCoV-HKU1 ou proteína S1 recombinante como controles positivos, e incluir lisados de células não infectadas ou de coronavírus heterólogos como controles negativos.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser usado para detecção direta ou como anticorpo de captura; o emparelhamento com um clone diferente ou método de detecção pode melhorar a sensibilidade do ensaio.
• Observe que a reatividade cruzada foi validada apenas para HCoV-HKU1; o desempenho com outros coronavírus deve ser verificado independentemente.

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