Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-HCRT para WB, ELISA - O43612

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HCRT

• O HCRT codifica o precursor dos neuropeptídeos orexina, também conhecidos como hipocretina, envolvidos na regulação do comportamento alimentar e dos ciclos sono-vigília.
• O precursor pré-pró-orexina é processado proteoliticamente para produzir dois neuropeptídeos ativos: orexina-A e orexina-B, que se ligam com alta afinidade aos seus respectivos receptores HCRTR1 e HCRTR2.
• A sinalização da orexina está implicada em funções homeostáticas mais amplas, incluindo metabolismo energético, regulação autonômica, equilíbrio hormonal e homeostase de fluidos.
• O HCRT é expresso predominantemente no núcleo subtalâmico, com níveis indetectáveis em outras regiões cerebrais testadas e tecidos periféricos (coração, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim, pâncreas).
• Subcelularmente, o precursor se localiza no retículo endoplasmático rugoso e é secretado via vesículas citoplasmáticas nos terminais sinápticos.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem amidação, formação de ligação dissulfeto e formação de ácido piroglutâmico N-terminal, que são críticas para a atividade do neuropeptídeo.
• Clinicamente, a disfunção do HCRT está associada a variantes de doença ligadas à narcolepsia e outros distúrbios do sono (palavra-chave UniProt: Variante de doença).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para detecção por Western blot, considere o peso molecular previsto de 13 kDa; valide o anticorpo no seu sistema de amostra usando controles positivos apropriados de tecido cerebral (núcleo subtalâmico) ou proteína recombinante.
• Devido à expressão restrita do HCRT, garanta o enriquecimento da amostra a partir do sistema nervoso central; tecido de coração, placenta, fígado ou rim pode servir como controle negativo com base nos níveis indetectáveis relatados.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser explorado como um reagente de captura ou detecção; otimize a concentração de revestimento e as condições de bloqueio empiricamente.
• A reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato foi relatada; no entanto, o alinhamento de sequência da região do imunógeno entre espécies é recomendado para confirmar a especificidade.
• Considere ensaios de pré-absorção ou competição com peptídeo para confirmar a especificidade se bandas inespecíficas aparecerem no Western blot.

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