Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-HDAC3 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - O15379

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HDAC3

• HDAC3 é uma histona deacetilase que remove grupos acetil dos resíduos de lisina nas histonas core (H2A, H2B, H3, H4) e em proteínas não histônicas, contribuindo para a repressão epigenética e a regulação transcricional.
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• Ela atua em grandes complexos multiproteicos, como o complexo repressor N-Cor, para modular a expressão gênica e desempenha papel na repressão transcricional mediada por BCL6, desacetilando H3K27 em elementos enhancers.
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• Além das histonas, HDAC3 desacetila alvos não histônicos incluindo KAT5, MEF2D, MAPK14, RARA e STAT3, influenciando diversos processos celulares como inflamação e ritmo circadiano.
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• Ela também atua como uma proteína-lisina deacilase, removendo grupos acil como crotonil, lactil, 2-hidroxisobutiril e isonicotinil dos resíduos de lisina, medeando assim a decrotonilação de MAPRE1/EB1 e a delactilação de NBN/NBS1 para regular o reparo de DNA via recombinação homóloga.
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• Em células endoteliais, HDAC3 contribui para a expressão de HMOX1 mediada por NFE2L2 via uma via dependente de PI(3)K/mTORC2/Akt, promovendo a sobrevivência sob estresse oxidativo.
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• Subcelularmente, HDAC3 se localiza principalmente no núcleo e nos cromossomos, mas também é encontrada no citoplasma e no citosol, o que é consistente com seus papéis na regulação da cromatina e na transdução de sinal.
• Ela é amplamente expressa em diversos tecidos e está sujeita a modificações pós-traducionais incluindo fosforilação e ubiquitinação, como indicado pelas palavras-chave: Fosfoproteína, Conjugação Ubl.
• HDAC3 desempenha um papel crítico no relógio circadiano regulando a ubiquitinação de BMAL1 e as interações com CRY de maneira independente de deacetilase, e o complexo NCOR1-HDAC3 controla a expressão circadiana de genes relógio e genes do metabolismo lipídico no fígado.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região C-terminal (aminoácidos 299-428) da HDAC3 humana, que é altamente conservada; recomendamos realizar alinhamento de sequência para avaliar a reatividade cruzada com camundongo, rato e macaco.
• Para Western blotting, é previsto uma banda esperada de ~49 kDa; valide em lisados de controle positivo de linhagens celulares com expressão ampla (por exemplo, HeLa, Jurkat).
• Em imunofluorescência e imuno-histoquímica, HDAC3 geralmente apresenta localização nuclear e citoplasmática; as condições de fixação e permeabilização podem precisar de otimização para tipos celulares ou tecidos específicos.
• O anticorpo é compatível com ELISA; experimentos de titulação são recomendados para estabelecer as concentrações de trabalho ideais para cada formato de ensaio.

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