Anticorpo Policlonais Anti-HDAC4 para WB, IHC-P, ELISA - P56524

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HDAC4

• A HDAC4 é uma histona desacetilase da classe IIa que reprime a transcrição ao remover grupos acetil das lisinas do terminal N das histonas core (H2A, H2B, H3, H4), promovendo a condensação da cromatina.
• Através da sua extensão N-terminal, a HDAC4 interage com os fatores de transcrição MEF2 (MEF2A, MEF2C, MEF2D), regulando a diferenciação e a hipertrofia muscular.
• No câncer de mama, a HDAC4 participa do silenciamento epigenético mediado por MTA1 do gene ESR1, contribuindo para a resistência à terapia hormonal.
• A HDAC4 desacetila HSPA1A e HSPA1B na lisina 77, aumentando a sua interação com a co-chaperona STUB1 e influenciando o controle da qualidade proteica. Referências relacionadas: PMID:27708256
• A HDAC4 realiza transporte entre o núcleo e o citoplasma; a fosforilação por quinases como a CaMK promove a ligação à proteína 14-3-3 e a retenção citoplasmática, enquanto a sumoilação e a ubiquitinação regulam a sua estabilidade e localização.
• A enzima é dependente de zinco, com um domínio catalítico conservado que coordena o Zn²⁺; mutações que desestabilizam a ligação ao metal prejudicam a sua atividade.
• O splicing alternativo do gene HDAC4 gera isoformas com expressão tecido-específica e funções regulatórias distintas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os resíduos 451–650, localizados dentro do domínio desacetilase conservado; esta região tem mais de 95% de identidade entre humano, camundongo e rato, o que explica a ampla reação cruzada.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 119 kDa; use lisados enriquecidos em fração nuclear (por exemplo, de células HeLa, C2C12) e valide com controles positivos e negativos apropriados.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato pH 6.0) e a diluição do anticorpo primário devem ser otimizadas; tanto padrões de coloração nuclear quanto citoplasmática são possíveis, dependendo do tecido e do estado da doença.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se o pareamento com um anticorpo de detecção validado contra HDAC4 para ensaios sandwich.
• A natureza policlonal oferece amplificação robusta do sinal, mas a consistência entre lotes deve ser verificada para aplicações quantitativas.

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