Anticorpo monoclonal recombinante de coelho anti-Heme Oxigenase 1 (HO-1/HMOX1) para WB, IP, IF, IHC, ELISA - P09601 / P14901

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Heme Oxigenase 1

• A heme oxigenase 1 (HO-1) é codificada pelo gene HMOX1 e também é conhecida como HSP32; é membro da família das heme oxigenases e funciona como uma enzima ancorada ao retículo endoplasmático.
• A HO-1 catalisa a clivagem oxidativa do heme na ponte alfa-meteno, produzindo monóxido de carbono (CO), biliverdina IXalfa e ferro ferroso, uma etapa crítica no catabolismo do heme e na reciclagem do ferro (PubMed:11121422, PubMed:19556236, PubMed:7703255). Referências relacionadas: PMID:11121422 PMID:19556236 PMID:7703255
• Os efeitos citoprotetores da HO-1 são mediados por sua capacidade de degradar o heme livre pró-oxidante, prevenindo assim a apoptose induzida pelo heme (PubMed:20055707). Referências relacionadas: PMID:20055707
• A HO-1 localiza-se na membrana do retículo endoplasmático por meio de uma hélice transmembranar C-terminal, posicionando-se para uma interação ideal com os substratos de heme.
• Modificações pós-traducionais, como a fosforilação, juntamente com suas propriedades de ligação ao heme e ao ferro, classificam a HO-1 como uma fosfoproteína, metaloproteína e oxidoredutase.
• Durante a infecção por SARS-CoV-2, a HO-1 promove a autofagia mediada por ORF3A, embora não seja necessária para a reticulofagia induzida por ORF3A.
• No câncer renal, a expressão da proteína HO-1 está aumentada em comparação com o tecido normal, sugerindo um papel na tumorigênese.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Como o imunógeno corresponde à Hmox1 de camundongo (aa 1-266), espera-se que o anticorpo reconheça a HO-1 humana e de camundongo; os pesquisadores devem validar a especificidade na espécie pretendida por meio de controles positivos endógenos.
• Para Western blot, prevê-se uma banda próxima de 33 kDa; considere usar lisados celulares totais de células tratadas com heme ou submetidas à indução de estresse para aumentar a detecção.
• Ao realizar imunoprecipitação (IP), assegure a compatibilidade do anticorpo com as condições do tampão e confirme a captura por imunoblotting com um anticorpo anti-HO-1 diferente.
• Para imunofluorescência (IF) e imuno-histoquímica (IHC), inclua etapas adequadas de fixação e permeabilização; use cortes de tecido ou células conhecidas por expressar HO-1 (por exemplo, tecido de câncer renal ou macrófagos estimulados com heme) como controles positivos.
• Em aplicações de ELISA, otimize as concentrações do antígeno de revestimento e do anticorpo de detecção utilizando padrões de proteína HO-1 recombinante.

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