Anticorpo Monoclonal Anti-HER2/ErbB2 para Citometria de Fluxo - P04626

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HER2/ErbB2

• Identidade da Proteína e Isoformas: Receptor tirosina-quinase erbB-2, também conhecido como HER2, Neu, CD340 ou p185erbB2. Codificado pelo gene ERBB2, funciona como um receptor crítico na superfície celular em vias de transdução de sinal que controlam o crescimento e a diferenciação celular.
• Função no Nucleossomo/Cromatina Central: Não é diretamente uma proteína da cromatina, mas a sinalização do HER2 influencia programas de expressão gênica. É um componente essencial dos complexos receptores de neuregulina, embora as neuregulinas não se liguem a ele diretamente; em vez disso, requer um correceptor para interação com o ligante. GP30 é um ligante potencial.
• Regulação dos Microtúbulos: Após ativação, o HER2 desencadeia a via MEMO1-RHOA-DIAPH1, fosforilando e inibindo a GSK3B. Isso impede a fosforilação de APC e CLASP2, permitindo sua associação à membrana e subsequente localização da MACF1, que captura e estabiliza os microtúbulos periféricos.
• Funções Nucleares: Transloca-se para o núcleo, onde atua como um regulador transcricional. Liga-se à sequência 5'-TCAAATTC-3' no promotor de PTGS2/COX-2 para ativar a transcrição. Também participa na transcrição de CDKN1A dependente de STAT3 e SRC e aumenta a síntese de rRNA via RNA Pol I, promovendo a tradução proteica e o crescimento celular.
• Localização Subcelular: Encontrado na membrana celular, rufos, endossomos iniciais, citoplasma (região perinuclear) e núcleo. Esta distribuição dinâmica reflete seus diversos papéis na sinalização próxima à membrana e na regulação gênica nuclear.
• Especificidade Tecidual e Associação a Doenças: Expresso em vários tecidos tumorais, incluindo tumores mamários primários, e cânceres de intestino delgado, esôfago, rim e cavidade oral. A amplificação/superexpressão é uma característica de cânceres agressivos, tornando o HER2 um alvo diagnóstico e terapêutico chave.
• Principais Modificações Pós-Traducionais e Palavras-chave: Contém um peptídeo sinal, um grande domínio extracelular, uma hélice transmembrana de passagem única e um domínio intracelular de tirosina quinase. Fortemente glicosilado com ligações dissulfeto. A autofosforilação em resíduos de tirosina é crítica para a atividade quinásica. Palavras-chave incluem ligação a ATP, quinase, transferase, glicoproteína, fosfoproteína, variante de doença, proto-oncogene.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra uma proteína recombinante correspondente ao domínio extracelular (aminoácidos 23‑652) do HER2 humano, tornando-o adequado para detectar HER2 na superfície celular por citometria de fluxo (CF) sem permeabilização. Considere titular o anticorpo para otimizar as relações sinal-ruído para seu modelo celular específico.
• Para controles positivos, use linhagens celulares que superexpressam HER2, como SK‑BR‑3 ou BT‑474. Valide a coloração com um controle de isotipo apropriado para confirmar a especificidade.
• Se for necessária a detecção intracelular ou total de HER2, observe que a fixação e a permeabilização podem alterar a acessibilidade do epítopo. Valide o anticorpo em suas condições de ensaio e considere a coloração em células vivas para alvos apenas de superfície.
• A reatividade cruzada com espécies além da humana não foi testada. Se estiver trabalhando com amostras não humanas, confirme a reatividade experimentalmente.
• Sempre inclua um corante de viabilidade para excluir células mortas, que podem aumentar a ligação inespecífica.

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