Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-HER2/ErbB2 para WB, IHC, IF - P04626

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HER2/ErbB2

• A tirosina quinase de receptor de proteína erbB-2 (também conhecida como HER2, Neu, CD340) é um membro da família do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) e funciona como um oncogene em vários tipos de câncer. Ela não possui um ligante direto conhecido, mas atua como um coreceptor para formar complexos de sinalização ativos com outros membros da família EGFR após a ligação de neuregulina.
• O HER2/ErbB2 desempenha um papel crítico na regulação do crescimento, diferenciação e sobrevivência celular através de vias de sinalização a jusante, incluindo as cascatas PI3K/AKT e RAS/RAF/MEK/ERK. Ele também medeia a estabilização dos microtúbulos através da via MEMO1-RHOA-DIAPH1, impactando a polaridade e migração celular.
• A proteína localiza-se predominantemente na membrana celular, mas após a ativação pode translocar para o núcleo, onde funciona como um fator de transcrição. Ela liga-se a sequências promotoras específicas (por exemplo, TCAAATTC) e regula genes como PTGS2/COX-2 e CDKN1A, aumentando a síntese de rRNA e o crescimento celular.
• A distribuição subcelular inclui membrana celular, membranas franjadas, endossomos precoces, citoplasma, região perinuclear e núcleo, refletindo seu tráfego dinâmico e papéis multifuncionais.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, glicosilação e formação de ligações dissulfeto, que são essenciais para sua estabilidade, dimerização e atividade de quinase.
• Especificidade tecidual: Altamente expresso em uma variedade de tecidos de tumores epiteliais, incluindo tumores primários de mama, bem como tumores do intestino delgado, esôfago, rim e cavidade oral, tornando-o um biomarcador chave e alvo terapêutico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende o domínio extracelular (aa 23-652), permitindo a detecção do HER2/ErbB2 de comprimento total. Esta região é comumente alvo em muitos anticorpos de diagnóstico e pode fornecer especificidade favorável.
• Para Western blotting, a banda esperada é de aproximadamente 138 kDa. Use marcadores de peso molecular apropriados e valide com uma linhagem celular de controle positivo conhecida por superexpressar HER2, como SK-BR-3 ou BT-474.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF-P), métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6.0, induzido por calor) podem ser necessários. Titule o anticorpo para otimizar a relação sinal-ruído para seu tecido específico e protocolo de fixação.
• Para IHC multiplex (mIHC), verifique a compatibilidade com outros anticorpos primários e sistemas de detecção. Devido à sua expressão robusta em certos tumores, considere usar uma série de diluições para evitar conversa cruzada entre canais.
• A reatividade deste anticorpo foi validada para amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada e deve ser verificada experimentalmente se necessário.

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