Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-HER2/ErbB2 para WB, IHC-P, ELISA - P04626

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 (receptor tirosina-proteína quinase erbB-2, também conhecido como Neu, CD340, p185erbB2) é um membro da família do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR/ERBB), codificado pelo proto-oncogene ERBB2. Atua como um oncogênico condutor em vários tipos de câncer.
• A proteína atua como um coreceptor essencial dentro de complexos de receptor de neuregulina, carecendo de capacidade de ligação direta ao ligante, mas mediando a transdução de sinal após heterodimerização com outros membros da família ERBB. A ativação desencadeia vias a jusante, incluindo a cascata de sinalização MEMO1-RHOA-DIAPH1, que inibe a GSK3B, levando à captura e estabilização de microtúbulos na periferia celular.
• No núcleo, o HER2/ErbB2 serve como um regulador transcricional. Liga-se ao promotor PTGS2/COX-2 na sequência 5'-TCAAATTC-3' para ativar a transcrição e está implicado na ativação transcricional de CDKN1A via STAT3 e SRC. Além disso, aumenta a transcrição de rRNA pela RNA polimerase I, promovendo a síntese proteica e o crescimento celular.
• Subcelularmente, o HER2/ErbB2 localiza-se principalmente na membrana celular, incluindo membranas de franjas (ruffles), e trafega através de endossomos precoces. Também é encontrado no citoplasma, região perinuclear e núcleo, refletindo seus papéis dinâmicos de sinalização e regulação.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação e formação de ligações dissulfeto, consistentes com sua natureza de receptor tirosina quinase. A proteína possui domínios de ligação a ATP e quinase críticos para a atividade enzimática.
• HER2/ErbB2 é superexpresso em uma ampla gama de tecidos tumorais, particularmente tumores de mama, intestino delgado, esôfago, rim e cavidade oral. Sua superexpressão específica por tecido o torna um biomarcador clínico chave e alvo terapêutico.
• O registro UniProt anota o HER2/ErbB2 com características como iniciação alternativa, splicing alternativo, rearranjo cromossômico e variantes de doença, destacando sua importância na biologia do câncer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo policlonal foi produzido contra um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1156–1255, correspondente ao domínio intracelular C-terminal do HER2/ErbB2 humano. Esta região é conservada entre humanos, camundongos e ratos, apoiando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima de 138 kDa. Use lisados de controle positivo de linhagens celulares com superexpressão de HER2 (por exemplo, SK-BR-3, BT-474) e valide com controles negativos apropriados.
• Em imuno-histoquímica (parafina), considere métodos de recuperação de antígeno e validação usando seções conhecidas de carcinoma de mama HER2-positivo. O sinal pode ser membranoso, citoplasmático ou ambos, dependendo da fixação e das características do tumor.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção contra a proteína ou peptídeo recombinante HER2/ErbB2; o emparelhamento com um anticorpo monoclonal bem caracterizado pode aprimorar o desempenho do ensaio.
• A otimização dos fatores de diluição e condições de incubação é recomendada em todas as aplicações.

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