Anticorpo Policlonal Anti-HGFAC para WB e ELISA - Q04756

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HGFAC

• O HGFAC, também conhecido como protease serina ativadora do fator de crescimento de hepatócitos, é uma enzima secretada que converte o pro-HGF inativo (HGF de cadeia única) em HGF ativo (heterodímero ligado por dissulfeto) por meio de clivagem proteolítica, essencial para iniciar a sinalização do receptor HGF/MET.
• Essa ativação desencadeia cascatas subsequentes envolvidas na proliferação celular, motilidade, morfogênese e angiogênese, desempenhando um papel fundamental no desenvolvimento, na regeneração tecidual e na progressão do câncer.
• O HGFAC é sintetizado como um zimogênio e contém vários domínios conservados: um peptídeo-sinal N-terminal, um domínio semelhante ao EGF, um domínio kringle e um domínio de protease serina C-terminal, característicos da família de fatores de crescimento relacionados ao plasminogênio.
• A proteína é expressa predominantemente no fígado, em consonância com sua função essencial na regeneração e na homeostase hepáticas.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada ao N e formação de pontes dissulfeto, cruciais para o dobramento correto, a estabilidade e a atividade enzimática.
• Subcelularmente, o HGFAC está localizado no espaço extracelular após a secreção, onde exerce sua função ativadora.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aa 408-655), que inclui uma porção do domínio de protease serina; considere a localização desse epítopo ao desenvolver ensaios que exijam a detecção de formas processadas ou não processadas.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima de 71 kDa (representando o zimogênio de comprimento total ou a cadeia pesada processada); valide a especificidade da banda usando lisados de tecido hepático ou proteína HGFAC recombinante como controles positivos.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser adequado para capturar ou detectar HGFAC em fluidos biológicos, como soro ou meio condicionado; a reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato deve ser confirmada independentemente na matriz de amostra relevante.
• Como o HGFAC é uma protease secretada, colete e manuseie as amostras em condições que preservem a estabilidade da proteína e evitem sua degradação — considere o uso de coquetéis de inibidores de protease e mantenha as amostras no gelo.
• A ativação da sinalização do HGF geralmente requer tanto o HGFAC quanto seu substrato, o pro-HGF; estudos funcionais podem se beneficiar da coexpressão ou suplementação com pro-HGF recombinante.

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