Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-HHLA2 para WB, IHC-P e ELISA - Q9UM44

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HHLA2

• A HHLA2 (também conhecida como B7-H7, B7y, B7-H5) é um membro da família B7 de ligantes reguladores imunes, caracterizada por um domínio de imunoglobulina, ligações dissulfeto e motivos de glicosilação.
• Funciona como uma molécula coestimuladora em células apresentadoras de antígenos, interagindo com o TMIGD2 em células T para melhorar a ativação mediada por TCR, a proliferação e a produção de citocinas através de uma cascata de sinalização dependente de AKT.
• A HHLA2 é uma glicoproteína transmembrana do tipo I de passagem única localizada na superfície celular, com um péptido sinal, domínios extracelulares tipo Ig, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática.
• É expressa numa variedade de tecidos, incluindo cólon, rim, testículo, pulmão e pâncreas, e em níveis mais baixos no intestino delgado, fígado e músculo esquelético. Nas células imunes, é altamente expressa em células B, células dendríticas e macrófagos, mas não é detetada em células T.
• A proteína sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas que podem diferir em propriedades funcionais.
• Modificações pós-traducionais principais incluem a glicosilação N-ligada e a formação de ligações dissulfeto, que são críticas para a sua estabilidade estrutural e interações ligante-receptor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio, correspondente ao domínio extracelular (aa 30-200), foi concebido para gerar anticorpos que reconhecem a HHLA2 nativa, potencialmente adequados para detetar a proteína expressa na superfície em IHC-P e a proteína total em WB.
• Para o western blot, considere o uso de condições redutoras para resolver estruturas ligadas por dissulfeto; o peso molecular previsto é de ~47 kDa, que pode parecer maior devido à glicosilação.
• Valide a especificidade do anticorpo em linhas celulares humanas ou tecidos relevantes conhecidos por expressarem HHLA2 (por exemplo, cólon, rim), usando controlos negativos (por exemplo, células T) para confirmar a ausência de reatividade cruzada.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção; estabeleça experimentalmente as condições ideais de revestimento e bloqueio.

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