Anti-HIF1α Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16665

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HIF1α

• HIF1α (fator indutível por hipóxia 1-alfa) é um regulador transcricional mestre da resposta adaptativa celular e sistêmica à hipóxia, codificado pelo gene HIF1A (também conhecido como BHLHE78, MOP1, PASD8). Referências relacionadas: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032

• Sob condições hipóxicas, o HIF1α dimeriza com ARNT e liga-se aos elementos de resposta à hipóxia (HREs) para ativar a transcrição de mais de 40 genes alvo envolvidos na entrega de oxigênio, angiogênese e reprogramação metabólica (por exemplo, EPO, VEGF, enzimas glicolíticas). Referências relacionadas: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032

• O heterodímero HIF1α-ARNT recruta coativadores transcricionais como CREBBP e EP300 para iniciar a expressão do gene alvo. Referências relacionadas: PMID:16543236, PMID:9887100

• Desempenha um papel crítico na vascularização embrionária, angiogênese tumoral e na fisiopatologia da doença isquêmica. Referências relacionadas: PMID:22009797

• A localização subcelular é principalmente citoplasmática sob normóxia; após a estabilização hipóxica, o HIF1α transloca para o núcleo e para os speckles nucleares para executar suas funções transcricionais.

• O HIF1α sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo hidroxilação, acetilação, fosforilação, S-nitrosilação e ubiquitinação, que regulam estritamente sua estabilidade e atividade transcricional.

• Expresso na maioria dos tecidos humanos com os níveis mais altos no rim e no coração, o HIF1α é frequentemente superexpresso em uma ampla gama de cânceres e suas metástases devido à hipóxia intratumoral e mutações oncogênicas.

• Durante a infecção por SARS-CoV-2, o HIF1α é necessário para a indução da glicólise em monócitos, promovendo um estado pró-inflamatório e a replicação viral. Referências relacionadas: PMID:32697943

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 400–500 do HIF1α humano (NP_001521.1), o que pode contribuir para a reatividade cruzada do anticorpo com ortólogos de camundongo e rato.
• Para Western blot (WB), o HIF1α geralmente migra em 93–96 kDa; bandas adicionais correspondentes a isoformas de splicing ou formas modificadas podem ser observadas. Valide no sistema de amostra relevante, de preferência usando estímulos hipóxicos para aumentar a expressão do alvo.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), recomenda-se a otimização da fixação, recuperação de antígeno e amplificação de sinal. Considere incluir amostras de tecidos hipóxicos como controles positivos.
• Como com todos os anticorpos policlonais, a consistência entre lotes deve ser verificada e testes piloto são aconselhados para confirmar a adequação para suas condições específicas de ensaio.

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