Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-HIF1AN/FIH-1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NWT6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HIF1AN (Fator Inibidor de HIF-1)

• HIF1AN (Fator inibidor de HIF-1), também conhecido como FIH-1 ou hidroxilase de asparagina do fator indutível por hipóxia, é uma dioxigenase dependente de oxigênio de 40,3 kDa codificada pelo gene HIF1AN (GeneID 55662).
• Ele hidroxila principalmente o HIF-1 alfa em Asn-803 no domínio C-terminal de transativação (CAD) em condições normóxicas, impedindo a interação com coativadores transcricionais como CBP/p300, regulando assim a resposta hipóxica.
• Além do HIF-1α, o FIH-1 hidroxila resíduos específicos de asparagina, aspartato e histidina dentro dos domínios de repetição de anquirina (ARD) de várias proteínas, incluindo NFKB1, NFKBIA, NOTCH1, ASB4 e TNKS2.
• O FIH-1 está localizado predominantemente no núcleo e no citoplasma, com enriquecimento na região perinuclear, consistente com seus papéis duplos na regulação transcricional e sinalização citoplasmática.
• Através da hidroxilação do NOTCH1, o FIH-1 regula negativamente a atividade do NOTCH1, acelerando assim a diferenciação miogênica; inversamente, regula positivamente o ASB4 para promover a diferenciação vascular.
• A proteína contém domínios de ligação de ferro e catalíticos de dioxigenase, e sua atividade é modulada pela acetilação, destacando seu papel como um sensor chave que liga a disponibilidade de oxigênio aos resultados transcricionais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1–349, cobrindo a proteína FIH-1 de comprimento total; isso pode elicitar reconhecimento de epítopos semelhante a policlonal, apoiando a detecção robusta em múltiplas aplicações. Para Western blot, uma banda em torno de 41 kDa é esperada em condições redutoras/denaturantes; considere incluir lisados celulares normóxicos e hipóxicos para avaliar a expressão endógena.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), os protocolos de recuperação de antígeno podem precisar de otimização; tecidos de controle com expressão conhecida alta de FIH-1 (por exemplo, rim, fígado) devem ser validados juntamente com amostras tratadas com knockout ou siRNA.
• Para ELISA, aconselha-se o emparelhamento com um anticorpo de detecção contra um epítopo distinto; certifique-se de que as curvas padrão incluam a proteína HIF1AN recombinante (comprimento total ou fragmento) para confirmar a especificidade do ensaio.

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