Anticorpo Policlonico Anti-HIF1AN/FIH1 de Coelho [Validado por KO] para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9NWT6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HIF1AN

• O inibidor do fator 1-alfa induzido por hipóxia (HIF1AN), também conhecido como Fator inibidor de HIF-1 (FIH-1) e asparagina hidroxilase do fator induzido por hipóxia, é uma enzima dioxigenase.
• HIF1AN hidroxila HIF-1 alfa na asparagina 803 no domínio de transativação C-terminal, atuando como um sensor de oxigênio para regular a resposta hipóxica.
• Sob condições normóxicas, essa hidroxilação impede a interação do HIF-1 com coativadores transcricionais como CBP/p300, reprimindo assim a expressão de genes induzidos por hipóxia.
• Além do HIF, HIFAN hidroxila resíduos de asparagina, aspartato e histidina dentro dos domínios de repetição de anquirina de diversos substratos (por exemplo, NFKB1, NOTCH1, ANK1, TNKS2), influenciando múltiplas vias de sinalização.
• Ele regula negativamente a atividade de NOTCH1, acelerando a diferenciação miogênica, e regula positivamente a atividade de ASB4 para promover a diferenciação vascular.
• HIF1AN localiza-se predominantemente no núcleo, mas também é encontrado no citoplasma e na região perinuclear.
• Palavras-chave adicionais incluem dioxigenase, ligação a ferro, ligação a metal, oxidorredutase e acetilação, refletindo suas propriedades catalíticas e regulatórias.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 1-349, quase comprimento total) pode gerar anticorpos policlonais que reconhecem múltiplos epítopos, potencialmente aumentando a sensibilidade da detecção.
• Para Western blot, espere uma banda específica perto de 41 kDa; a validação por knockout (KO) é fortemente recomendada para confirmar a especificidade do anticorpo.
• Em IHC-P, otimize a recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato pH 6,0) e valide a coloração em amostras de tecido relevantes.
• Para IF/ICC, fixe as células com paraformaldeído e permeabilize com Triton X-100; confirme a coloração em células de controle positivo apropriadas.
• Para IP, use esferas padrão de agarose Proteína A/G para IgG de coelho; inclua um controle de isotipo de IgG.
• Para ELISA, titule o anticorpo como reagente de captura ou detecção e valide na matriz de amostra relevante.
• A reatividade cruzada relatada com camundongo e rato sugere epítopos conservados; não obstante, verifique o alinhamento da sequência da espécie para sua aplicação específica.

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