Anticorpo Monoclonal Anti-Histona H1.2 para WB, IF/ICC, ELISA - P16403

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H1.2

• Condensação core da cromatina: A Histona H1.2 liga o DNA ligador entre nucleossomos para formar a fibra de cromatina e é necessária para a condensação das cadeias de nucleossomos em fibras estruturadas de ordem superior. Sua ausência leva à descompactação global da cromatina (PubMed:26581166, 38530350). Referências relacionadas: PMID:26581166 PMID:38530350
• Função de leitor de histona: Reconhece e liga especificamente a histona H3 trimetilada na lisina 27 (H3K27me3) (PubMed:26581166). Referências relacionadas: PMID:26581166
• Deposição de H3K27me3 mediada por PRC2: Promove a formação da marca H3K27me3 pelo complexo PRC2/EED-EZH2, facilitando provavelmente a restauração de H3K27me3 após a replicação (PubMed:37429872, 40516528). Referências relacionadas: PMID:37429872 PMID:40516528
• Regulação do splicing: Atua como regulador do splicing, particularmente dos eventos de exclusão de éxons e retenção de íntrons, ligando-se a éxons com alta afinidade e afetando a elongação da RNA polimerase II (PubMed:37922872). Referências relacionadas: PMID:37922872
• Regulação transcricional: Regula a transcrição de genes individuais por meio da remodelação da cromatina, espaçamento de nucleossomos e metilação do DNA (PubMed:38530350). Referências relacionadas: PMID:38530350
• Localização subcelular: Encontrada no núcleo, especificamente no nucléolo e nos cromossomos.
• Modificações pós-traducionais: Acetilação, ADP-ribosilação, citrulinação, hidroxilação, metilação e fosforilação foram identificadas por sequenciamento direto de proteínas e proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1-100 da Histona H1.2 humana (P16403), visando a região N-terminal. Considere usar o antígeno peptídico como controle positivo em ELISA.
• Para aplicações de Western blot, desnature as amostras em condições redutoras e otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para levar em conta a natureza altamente básica e o pequeno tamanho (21 kDa) da histona H1.2.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), inclua uma etapa de permeabilização para permitir o acesso ao núcleo e faça a co-coloração com um marcador nuclear (por exemplo, DAPI) para confirmar a localização. Valide o anticorpo em linhagens celulares ou tecidos conhecidos por expressar a Histona H1.2.
• Ao usar o ELISA, considere que a sensibilidade pode depender da conformação nativa da proteína; o antígeno recombinante ou peptídico pode ser adequado para curvas padrão.

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