Anticorpo Policlonal Anti-Histona H1t para WB, IHC-P, ELISA - P22492

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H1t

• Histona H1t, também conhecida como histona H1 testicular, é uma histona ligadora específica de testículo que se liga a nucleossomos e facilita a compactação da cromatina de ordem superior (Provável).
• Diferentemente de outros subtipos de H1, a H1t forma cromatina menos compactada, o que acredita-se que promova a recombinação homóloga durante a meiose (PubMed:26757249). Referências relacionadas: PMID:26757249
• Codificada pelo gene H1-6 (anteriormente HIST1H1T), a H1t é classificada entre as variantes independentes da replicação da histona H1 que exibem padrões de expressão específicos de tecido.
• Subcelularmente, a H1t se localiza no núcleo e está associada aos cromossomos, consistente com seu papel como proteína estrutural de ligação ao DNA.
• A H1t sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e citrulinação, que podem regular sua dinâmica de ligação à cromatina (Palavras-chave).
• Como marcador de desenvolvimento e diferenciação, a expressão de H1t está intimamente ligada à espermatogênese, servindo como indicador dos estágios meióticos e pós-meióticos no testículo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 150-207 da Histona H1t humana (região C-terminal). Este projeto pode permitir a detecção de H1t de comprimento total e possivelmente revelar modificações ou isoformas específicas da região C-terminal. Para uma identificação inequívoca de isoformas, considere combinar com um anticorpo específico da região N-terminal.
• Para aplicações de Western blot, recomenda-se o uso de extratos nucleares de tecido testicular ou linhagens celulares conhecidas por expressar H1t (por exemplo, espermatócitos), juntamente com controles de carregamento adequados e marcadores de peso molecular para confirmar a banda de ~22 kDa.
• Em imuno-histoquímica em parafina (IHC-P), seções de testículo são controles positivos ideais devido à expressão tecido-específica. As condições de recuperação de antígeno podem influenciar a coloração; otimize usando tampões padrão de citrato ou EDTA e valide com tecidos positivos e negativos conhecidos.
• Dada a reatividade cruzada com camundongo e rato, este anticorpo pode ser utilizado em modelos de roedores; no entanto, o alinhamento da sequência da região do imunógeno entre as espécies é recomendado para prever os padrões de reconhecimento.
• O desempenho do ELISA deve ser verificado revestindo com o peptídeo imunizante ou a proteína H1t recombinante e comparando as razões sinal-ruído com controles em branco adequados.

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