Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Histona H2AX para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16104

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2AX

• A Histona H2AX é uma variante da histona central H2A que substitui a H2A convencional em um subconjunto de nucleossomos.
• Desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica, controlando a acessibilidade do DNA.
• Necessária para a parada do ciclo celular mediada por ponto de verificação em resposta a baixas doses de radiação ionizante e para o reparo eficiente de quebras de fita dupla de DNA (DSBs) quando fosforilada em sua cauda C-terminal.
• Localiza-se no núcleo e na cromatina; recrutada rapidamente para locais de dano no DNA formando focos de γ-H2AX.
• Sujeita a diversas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, contribuindo para o código de histonas.
• Envolvida em interações hospedeiro-vírus e meiose, destacando suas diversas funções biológicas.
• Também conhecida como H2A.X, H2A/X e H2AFX, codificada pelo gene H2AX no cromossomo 11 humano.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 50-143) visa uma região altamente conservada, portanto, espera-se ampla reatividade cruzada entre espécies; sempre valide em seu sistema de amostra.
• Para WB, espere uma banda em ~15 kDa; use extratos de núcleo ou lisados celulares totais de células tratadas com agentes danificadores do DNA (por exemplo, radiação ionizante, etoposídeo) para avaliar a detecção específica de fosfo.
• Para IHC-P e IF/ICC, otimize a recuperação de antígeno e a coloração nuclear; os controles positivos incluem tecidos ou células expostos a danos no DNA.
• Para ELISA, considere usar uma proteína recombinante H2AX ou revestimento de peptídeo e realize ensaios de ligação competitiva para confirmar a especificidade.
• A titulação e a otimização do protocolo são essenciais para cada aplicação; comece com as diluições recomendadas e ajuste conforme necessário.

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