Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Histona H3 para WB, IHC-P, IP, ELISA, ChIP - Q16695 / P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3.1t (também conhecida como H3.4, H3/g) é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina, limitando a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares que necessitam do DNA como molde. Isso desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica.
• Os nucleossomos são compostos por duas cópias de cada histona central (H2A, H2B, H3, H4). A Histona H3 é fundamental para a hipótese do código das histonas, onde suas diversas modificações pós-traducionais (acetilação, metilação, fosforilação, etc.) governam a estrutura da cromatina e a expressão gênica.
• Codificada pelo gene H3-4 (HIST3H3), essa variante de histona específica do testículo é membro da família das histonas H3 dependentes de replicação, com expressão restrita principalmente às células testiculares.
• A proteína se localiza estritamente no núcleo e está associada aos cromossomos, o que é consistente com seu papel na organização da cromatina.
• As principais modificações pós-traducionais incluem acetilação, metilação, fosforilação, citrulinação, ADP-ribosilação e ubiquitinação, refletindo sua regulação dinâmica durante o ciclo celular e o desenvolvimento.
• Ela possui atividade de ligação ao DNA, contribuindo para a formação de estruturas de cromatina de ordem superior e mecanismos de herança epigenética.
• Com peso molecular calculado de aproximadamente 15,5 kDa (UniProt) e observado em 15 kDa, ele migra como uma histona central típica em SDS-PAGE.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado contra um peptídeo que compreende os aminoácidos 50-136 do HIST3H3 humano, uma região provavelmente exposta no contexto do nucleossomo; considere usar este anticorpo em aplicações como WB, IHC-P, IP, ELISA e ChIP, conforme indicado.
• Dada a ampla reatividade cruzada prevista, valide o anticorpo na sua espécie e tecido de interesse específicos, especialmente para amostras não humanas.
• A Histona H3 é altamente conservada entre as espécies; considere a possibilidade de reação cruzada com outras variantes de H3 se for necessária a discriminação precisa da variante.
• Otimize a concentração do anticorpo por titulação para cada aplicação, pois o desempenho pode variar entre os ensaios. Para ChIP, certifique-se de que condições adequadas de ligação cruzada e fragmentação são empregadas.
• Para western blotting, extratos totais de histonas ou histonas extraídos em meio ácido podem fornecer sinais mais limpos devido à natureza básica da proteína.

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