Anti-Histon H4 Coelho PolymAb® para WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P62805

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

• A Histona H4 é uma das quatro proteínas histonas centrais (H2A, H2B, H3, H4) que formam o octâmero do nucleossomo, envolvendo ~147 pb de DNA e compactando o genoma em cromatina.
• Como componente central do nucleossomo, a H4 desempenha um papel fundamental na regulação da acessibilidade do DNA para transcrição, replicação, reparo e na manutenção da estabilidade cromossômica.
• Em humanos, a H4 é codificada por 14 genes quase idênticos (H4C1–H4C16) agrupados em múltiplos loci cromossômicos, produzindo uma proteína conservada de 103 aminoácidos.
• A H4 localiza-se exclusivamente no núcleo e cromossomos, onde está sujeita a extensas modificações pós-traducionais (acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização, ubiquitinação, etc.) que constituem o "código das histonas" para governar a dinâmica da cromatina.
• Modificações na cauda N-terminal (aa 1–20) são críticas para a regulação gênica; por exemplo, a acetilação em lisinas específicas correlaciona-se com transcrição ativa, enquanto a metilação pode sinalizar ativação ou repressão dependendo do resíduo.
• Disrupções nos genes H4 ou marcas regulatórias estão ligadas a doenças; mutações raras causam fenótipos neurodesenvolvimentais incluindo deficiência intelectual, destacando a natureza essencial da histona H4 no desenvolvimento.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno tem como alvo os aminoácidos 1–100, abrangendo a cauda N-terminal e o domínio globular; considere que o reconhecimento do epítopo N-terminal pode ser afetado por densas modificações pós-traducionais em alguns contextos de cromatina.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda forte em ~11 kDa; inclua amostras de histonas extraídas com ácido como controles positivos para enriquecer proteínas básicas.
• Em imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), a cromatina compactada em regiões heterocromáticas pode mascarar o epítopo; protocolos de digestão suave com DNAse ou permeabilização branda podem melhorar a detecção.
• Para imunoprecipitação da cromatina (ChIP), valide a capacidade do anticorpo de enriquecer nucleossomos modificados vs. não modificados sob condições de reticulação e nativas, pois a acessibilidade do epítopo varia com a compactação da cromatina.
• Espera-se reatividade cruzada com camundongo e rato dada a alta conservação da sequência (H4 humano/camundongo são idênticas); no entanto, sempre confirme a especificidade na espécie e aplicação relevantes.

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