Anticorpo policlonal anti-HK1 para WB, ELISA - P19367

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da HK1

• A hexoquinase-1 (HK1), também conhecida como HK I ou hexoquinase da forma cerebral, é uma enzima glicolítica fundamental que catalisa a fosforilação dependente de ATP da D-glicose em D-glicose-6-fosfato, a primeira etapa e limitante da velocidade da glicólise.
  Referências relacionadas: PMID:1637300, PMID:25316723, PMID:27374331
• A HK1 apresenta ampla especificidade de substrato, fosforilando D-glicosamina, D-frutose, D-manose e 2-desoxi-D-glicose, mas não atua sobre a N-acetil-D-glicosamina.
• Na imunidade inata, a HK1 funciona como um receptor citosólico de reconhecimento de padrões para o peptidoglicano bacteriano; a porção de N-acetil-D-glicosamina inibe a atividade da HK1 e desencadeia sua liberação das mitocôndrias, levando à ativação do inflamassoma NLRP3.
  Referência relacionada: PMID:27374331
• Subcelularmente, a HK1 está predominantemente ancorada à membrana mitocondrial externa e também é encontrada no citosol.
• A enzima está sujeita a modificações pós-traducionais regulatórias, incluindo acetilação e fosforilação, e contém domínios de ligação a ATP e nucleotídeos característicos das quinases alostéricas.
• Isoformas específicas de tecido surgem por splicing alternativo: a isoforma 2 é específica de eritrócitos, enquanto as isoformas 3 e 4 são específicas dos testículos.
• Variações genéticas na HK1 estão associadas a vários distúrbios, como a doença de Charcot-Marie-Tooth, anemia hemolítica hereditária, retinite pigmentosa e deficiência intelectual.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blot (WB), espere uma banda próxima ao peso molecular calculado de 102 kDa. Valide a detecção em lisados de tecidos/células humanos, de camundongo ou de rato relevantes que expressem HK1.
• O imunógeno (aminoácidos 20–300) tem como alvo a região N-terminal; considere isso ao planejar experimentos de competição ou mapeamento de epítopos.
• Devido à natureza policlonal, algumas bandas inespecíficas podem aparecer; otimize as condições de bloqueio e a diluição do anticorpo primário para o seu sistema experimental específico.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser explorado como reagente de captura ou detecção; valide-o com proteína HK1 recombinante ou amostras positivas conhecidas.

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