Anticorpo Policlonal Anti-HLA Classe 1 ABC para WB, IHC-P, ELISA - P04439 / P01889 / P10321

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA Classe 1 ABC

• A cadeia alfa do HLA classe I (HLA-A, -B, -C) constitui a cadeia pesada da molécula clássica do complexo principal de histocompatibilidade classe I (MHCI). Ela se associa não covalentemente com a beta-2 microglobulina (B2M) para apresentar peptídeos processados intracelulares na superfície celular para vigilância imunológica.
• Em complexo com a B2M, as moléculas de HLA classe I exibem principalmente peptídeos derivados de vírus e tumores (8-13 resíduos) aos receptores de células T alfa-beta (TCR) em células T CD8+, orientando respostas de células T citotóxicas específicas a antígenos para eliminar células infectadas ou transformadas. Referências relacionadas: PMID:10449296, PMID:12138174, PMID:12393434
• Além disso, as moléculas de HLA classe I apresentam peptídeos próprios derivados de sequências sinal de proteínas secretadas ou de membrana, contribuindo para a tolerância das células T e prevenção da autoimunidade. Referências relacionadas: PMID:25880248, PMID:7506728, PMID:7679507
• Os alelos altamente polimórficos do HLA determinam motivos de ligação a peptídeos; por exemplo, HLA-A*02:01 (o alelo mais comum em populações humanas) apresenta epítopos virais imunodominantes como a proteína da matriz do IAV (GILGFVFTL) e gag-pol do HIV-1 (ILKEPVHGV), caracterizados por âncoras hidrofóbicas nas posições 2 e no C-terminal.
• As moléculas de HLA classe I são glicoproteínas integrais de membrana localizadas na membrana celular e na membrana do retículo endoplasmático, onde ocorrem o carregamento de peptídeos e o controle de qualidade.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de ligações dissulfeto, fosforilação e ubiquitinação; estas regulam a estabilidade, o tráfego e o reconhecimento imunológico.
• Expressas de forma ubíqua em quase todas as células nucleadas, as moléculas de HLA classe I são fundamentais para a homeostase do sistema imunológico e a discriminação próprio/não-próprio.
• Os anticorpos neste produto têm como alvo uma região conservada do N-terminal (aa 1-100) comum ao HLA-A, HLA-B e HLA-C, permitindo um amplo reconhecimento das moléculas clássicas de MHC classe I.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1-100 de HLA-A, -B e -C humano (baseado em NP_001229687.1). Esta região N-terminal inclui o domínio de ligação a peptídeos extracelular, garantindo reatividade com todas as três moléculas clássicas de MHC classe I. Para discriminação alélica específica, considere o uso de anticorpos específicos para alelos.
• Western blotting (WB): Em condições redutoras, espera-se uma banda em torno de 40 kDa. Valide em lisados de células humanas apropriadas (por exemplo, linfócitos, linhagens de células tumorais) com perfis conhecidos de expressão de HLA.
• Imunohistoquímica (IHC-P): Devido à natureza transmembrana do alvo, a recuperação antigênica usando recuperação de epítopo induzida por calor (HIER) em tampão citrato (pH 6.0) pode melhorar a detecção. Otimize a diluição do anticorpo usando tecidos de controle positivo (por exemplo, tonsila, baço) e negativo.
• ELISA: Adequado para ELISA direto ou sanduíche; emparelhe com anticorpos de detecção que reconheçam beta-2 microglobulina ou alelos específicos de HLA. Valide com proteínas HLA recombinantes ou complexos naturais de MHC classe I.

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