Anticorpo Monoclonal Anti-HLA-DQA1 para WB, IHC-P, ELISA - P01909

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DQA1

• O HLA-DQA1 codifica a cadeia alfa da molécula HLA-DQ (MHC de classe II), um heterodímero composto pelas subunidades alfa (DQA1) e beta (DQB1) encontrado em células apresentadoras de antígenos (APCs) e certas células epiteliais.
• Como uma molécula clássica de MHC de classe II, o heterodímero DQ apresenta antígenos peptídicos exógenos (10–30 resíduos) que foram internalizados via via endocítica para células T auxiliares CD4+, desempenhando assim um papel central na imunidade adaptativa.
• No retículo endoplasmático, o heterodímero DQA1/DQB1 se monta com o trímero da cadeia invariante (CD74), formando um complexo nãoamérico que é transportado para endossomos e lisossomos onde o CD74 é degradado sequencialmente, deixando o fragmento CLIP que é trocado por peptídeos antigênicos facilitado pelo HLA-DM.
• O HLA-DQA1 é uma glicoproteína transmembrana com uma topologia de membrana típica do tipo I, contendo um domínio extracelular de ligação a peptídeos, um domínio semelhante à imunoglobulina, uma hélice transmembrana de passagem única e uma cauda citoplasmática curta.
• Subcelularmente, a proteína trafega através da membrana do RE, Golgi, rede trans-Golgi, membranas endossomais/lisossomais e reside finalmente na membrana plasmática, refletindo seu papel dinâmico no processamento e apresentação de antígenos.
• Palavras-chave do UniProt (P01909) destacam seu envolvimento essencial na imunidade adaptativa, formação do complexo MHC II e notam modificações pós-traducionais, incluindo a formação de ligações dissulfeto e glicosilação N-ligada, que são críticas para sua estrutura e função.
• Polimorfismos no HLA-DQA1, isoladamente ou em combinação com o HLA-DQB1, estão fortemente associados à doença celíaca (daí o apelido CELIAC1) e outros distúrbios autoimunes, sublinhando sua relevância clínica.
• Além das APCs profissionais, as moléculas de MHC de classe II são expressas constitutivamente em células epiteliais do trato gastrointestinal, contribuindo para a vigilância imune local, uma característica distinta notada no trato GI.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal foi produzido contra um peptídeo sintético correspondente a uma sequência interna (aa 155-254) do HLA-DQA1 humano, sugerindo o reconhecimento de um epítopo linear provavelmente exposto em condições desnaturantes, o que apoia seu uso em WB.
• Para WB, considere executar lisados de células inteiras ou frações enriquecidas de membrana de células imunes humanas, de camundongo ou de rato (por exemplo, células B Raji, células dendríticas) em condições redutoras; uma banda próxima a 28 kDa é esperada para a cadeia alfa glicosilada.
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno pode otimizar a coloração; teste em tecido humano de tonsila, baço ou intestino fixado em formalina e incluído em parafina, bem como em órgãos linfoides de camundongo/rato, e valide com controles negativos apropriados.
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização do tampão de revestimento e do sistema de detecção; considere usar o anticorpo em um formato de ELISA sanduíche com um anticorpo de detecção pareado, se disponível.

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