Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-HLA-DRA para WB, IHC-P, ELISA - P01903

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DRA

• O HLA-DRA é a cadeia alfa do MHC classe II, também conhecido como antígeno DRA do MHC classe II, e se acopla à cadeia beta HLA-DRB para formar o complexo de apresentação de antígenos.
• Em complexo com o HLA-DRB, apresenta peptídeos antigênicos nas CPAs profissionais para o reconhecimento por linfócitos T CD4+, orientando as funções efetoras dos linfócitos T auxiliares, incluindo a resposta imune mediada por anticorpos e a ativação de macrófagos. Referências relacionadas: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Tipicamente apresenta antígenos peptídicos extracelulares de 10 a 30 aminoácidos originados da proteólise de antígenos endocitados nos lisossomos. Referências relacionadas: PMID:8145819
• No microambiente tumoral, apresenta peptídeos antigênicos gerados principalmente nas CPAs residentes no tumor, provavelmente via fagocitose de células tumorais apoptóticas ou macropinocitose de proteínas tumorais secretadas. Referências relacionadas: PMID:31495665
• Apresenta peptídeos derivados de proteínas intracelulares retidos nos autolisossomos após a macroautofagia, um mecanismo relevante para a seleção de células T no timo e a tolerância imune central. Referências relacionadas: PMID:17182262 PMID:23783831
• A seleção de epítopos imunodominantes segue dois modos de processamento: 'ligar primeiro, cortar/aparar depois' para peptídeos derivados de patógenos e 'cortar primeiro, ligar depois' para autoantígenos/auto peptídeos. Referências relacionadas: PMID:25413013
• O resíduo âncora na posição 1 do N-terminal do peptídeo, geralmente um grande resíduo hidrofóbico, é essencial para a interação de alta afinidade com as moléculas MHCII. Referências relacionadas: PMID:8145819
• O HLA-DRA se localiza na membrana celular, membrana do retículo endoplasmático, membranas dos endossomos precoces/tardios, membrana do lisossomo e membrana do autolisossomo.
• Expresso em CPAs profissionais (macrófagos, células dendríticas, linfócitos B) e células epiteliais tímicas. Referências relacionadas: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Glicoproteína com pontes dissulfeto e uma hélice transmembrana; sofre modificações pós-traducionais essenciais para a estabilidade e função do MHCII.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 100-200 do HLA-DRA humano; para validação analítica, considere usar proteína recombinante de comprimento total ou lisados celulares que expressam complexos nativos de MHC classe II.
• Para Western blot (WB), uma banda de aproximadamente 29 kDa é esperada em condições redutoras; otimize a diluição do anticorpo primário e use reagentes de detecção secundária apropriados.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária, e é aconselhável validar o padrão de coloração em tecidos de controle positivo, como linfonodo ou baço.
• No ELISA, garanta a cobertura ideal com o antígeno alvo e valide usando amostras de controle positivo e negativo conhecidas.
• Dado que este anticorpo é produzido contra uma sequência humana, confirme a reatividade cruzada ao usar amostras não humanas.

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