Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-HLA-DRA para WB, ELISA - P01903

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DRA

• O HLA-DRA codifica a cadeia alfa da molécula do MHC de classe II HLA-DR, que forma um heterodímero com a cadeia beta (HLA-DRB) para apresentar antígenos peptídicos na superfície de células apresentadoras profissionais de antígenos (APCs).
• O heterodímero HLA-DR apresenta antígenos peptídicos extracelulares (10–30 aminoácidos) às células T CD4+ por meio do receptor de células T (TCR), orquestrando assim respostas imunes adaptativas mediadas por células T auxiliares, incluindo a produção de anticorpos e a ativação de macrófagos.
  Referências relacionadas: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• A ligação de peptídeos ao MHCII é caracterizada por um grande resíduo âncora hidrofóbico na posição 1 da extremidade N-terminal do peptídeo, o que é fundamental para a interação de alta afinidade com a molécula do MHCII.
  Referências relacionadas: PMID:8145819
• No microambiente tumoral, o HLA-DRA medeia a apresentação de peptídeos derivados de tumores, que são gerados principalmente por APCs residentes no tumor por meio da fagocitose de células tumorais apoptóticas ou da macropinocitose de proteínas tumorais secretadas.
  Referências relacionadas: PMID:31495665
• O HLA-DRA participa da apresentação de antígenos intracelulares dependente de macroautofagia, um processo essencial para a seleção de células T no timo e para a tolerância imune central.
  Referências relacionadas: PMID:17182262 PMID:23783831
• A seleção de epítopos para apresentação pelo HLA-DR segue dois modos de processamento: “ligar primeiro, cortar/aparar depois” para antígenos derivados de patógenos e “cortar primeiro, ligar depois” para autopeptídeos.
  Referências relacionadas: PMID:25413013
• Subcelularmente, a proteína está localizada na membrana celular, no retículo endoplasmático, nos endossomos iniciais e tardios, nos lisossomos e nos autolisossomos, refletindo seu tráfego pela via de processamento e apresentação de antígenos.
• O HLA-DRA é expresso em nível proteico em APCs profissionais, como macrófagos, células dendríticas e células B, bem como em células epiteliais tímicas.
  Referências relacionadas: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• A proteína apresenta características estruturais que incluem um peptídeo-sinal N-terminal, uma região transmembrana, ligações dissulfeto, glicosilação e conjugação com ubiquitina, destacando sua regulação complexa e suas modificações pós-traducionais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 26–216 do HLA-DRA humano (domínio extracelular). Para ELISA, considere usar a proteína recombinante de comprimento completo como controle positivo e padrão.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 29 kDa. Garanta a transferência completa da proteína e use marcadores de peso molecular apropriados; valide com uma amostra positiva conhecida (humana, de camundongo ou de rato).
• Foi relatada reatividade cruzada com camundongo e rato; entretanto, a homologia de sequência deve ser verificada in silico, e o desempenho do anticorpo deve ser titulado e confirmado em lisados de tecidos ou células das espécies relevantes.
• Este anticorpo policlonal é adequado para WB e ELISA; para aplicações como imuno-histoquímica ou citometria de fluxo, pode ser necessária validação adicional.

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