Anticorpo policlonal de coelho Anti-HLA-DRA para WB, IHC-P, ELISA - P01903

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HLA-DRA

• HLA-DRA codifica a cadeia alfa do antígeno de histocompatibilidade HLA classe II, uma glicoproteína heterodimérica da superfície celular que se acopla ao HLA-DRB para formar o complexo MHC de classe II.
• A molécula MHCII apresenta peptídeos de antígenos extracelulares processados (10–30 aminoácidos) para células T auxiliares CD4+, iniciando respostas imunológicas adaptativas, como a produção de anticorpos e a ativação de macrófagos. Referências relacionadas: PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368, PMID:8145819
• HLA-DRA é expressa em células profissionais apresentadoras de antígeno, incluindo macrófagos, células dendríticas, linfócitos B e células epiteliais tímicas, o que é consistente com seu papel na vigilância imunológica e na seleção de células T. Referências relacionadas: PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665
• Subcelularmente, a proteína se localiza na membrana plasmática e em compartimentos vesiculares intracelulares — retículo endoplasmático, endossomos, lisossomos e autofagolisosomos — refletindo seu tráfego para o carregamento de antígenos.
• As principais modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação potencial, contribuindo para a estabilidade e a renovação do MHCII.
• A estrutura da proteína inclui um peptídeo sinal, domínios extracelulares, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática; as estruturas cristalinas do heterodímero DR avançaram na compreensão da ligação de peptídeos.
• No microambiente tumoral, HLA-DRA apresenta peptídeos derivados do tumor para células T, desempenhando um papel na imunidade antitumoral. Referências relacionadas: PMID:31495665
• O processamento autofagolisosomal de peptídeos intracelulares pelo MHCII é crucial para a seleção tímica de células T e a tolerância imunológica central. Referências relacionadas: PMID:17182262, PMID:23783831
• A seleção de epítopos imunodominantes segue dois modos: 'ligar primeiro, cortar/aparar depois' para peptídeos derivados de patógenos e 'cortar primeiro, ligar depois' para autoantígenos. Referências relacionadas: PMID:25413013

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 26–216) da HLA-DRA humana, permitindo a detecção potencial de conformações proteicas desnaturadas e nativas em aplicações como WB, IHC-P e ELISA.
• Na análise por Western blot, é esperada uma banda em torno de 29 kDa; no entanto, a glicosilação variável pode causar uma deslocação no peso molecular aparente. Valide o padrão de banda em uma linha celular ou lisado de tecido relevante.
• Para imunohistoquímica em seções embebidas em parafina, é recomendada a otimização da recuperação de antígenos. Tecidos de controle positivo incluem linfonodo humano, baço ou tonsila.
• A reatividade cruzada com rato já foi confirmada; para outras espécies, verifique a homologia de sequência da região do imunógeno antes do uso.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção de HLA-DRA em sobrenadantes de cultura celular ou lisados; considere o pareamento com anticorpos secundários adequados e otimize as condições de revestimento.

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