Anticorpo Policlonal Anti-HLA-DRB3 para WB e ELISA - P79483

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DRB3

• HLA-DRB3 codifica a cadeia beta da molécula de MHC classe II, que se associa à cadeia alfa HLA-DRA para formar um heterodímero na superfície das células apresentadoras de antígenos profissionais (APCs).
• O complexo MHC II apresenta antígenos peptídicos (geralmente com 10–30 aminoácidos, provenientes de proteínas endocitadas) às células T CD4+, orientando funções efetoras auxiliares, como a imunidade mediada por anticorpos e a ativação de macrófagos (PubMed:16148104, PubMed:19531622, PubMed:19830726). Referências relacionadas: PMID:16148104, PMID:19531622, PMID:19830726
• O gene possui vários alelos com repertórios distintos de ligação a peptídeos. O ALELO DRB3*01:01 apresenta epítopos da toxina tetânica e do HHV-6B (PubMed:19830726, PubMed:2463305, PubMed:2788702, PubMed:31020640). Referências relacionadas: PMID:19830726, PMID:2463305, PMID:2788702, PMID:31020640
• O ALELO DRB3*02:02 apresenta epítopos da toxina tetânica, EBV, HHV-6B, vírus da dengue, IAV e dos antígenos tumorais WT1, NY-ESO-1 e TP53 (PubMed:19830726, PubMed:2788702, PubMed:23569328, PubMed:31308093, PubMed:31020640, PubMed:31333679, PubMed:22929521, PubMed:19531622, PubMed:20368442, PubMed:30282837). Referências relacionadas: PMID:19830726, PMID:2788702, PMID:23569328, PMID:31308093, PMID:31020640, PMID:31333679, PMID:22929521, PMID:19531622, PMID:20368442, PMID:30282837
• O ALELO DRB3*03:01 apresenta peptídeos de M. tuberculosis e HCV (PubMed:32341563, PubMed:2788702, PubMed:16148104). Referências relacionadas: PMID:32341563, PMID:2788702, PMID:16148104
• Subcelularmente, está localizado na membrana celular, bem como nas membranas do retículo endoplasmático, dos endossomos tardios, dos lisossomos e dos autofagolisossomos.
• É expresso em APCs profissionais: monócitos/macrófagos, células dendríticas e células B.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação. Palavras-chave: Imunidade adaptativa, MHC II, Glicoproteína, Sinal, Transmembrana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 30–227, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer vários epítopos do domínio extracelular. Valide em linhagens relevantes de APCs (por exemplo, células B Raji e células dendríticas derivadas de monócitos) para WB e ELISA.
• Para WB, utilize SDS-PAGE redutor e aplique 20–30 µg de lisado; o peso molecular previsto é de aproximadamente 30 kDa em condições redutoras. Otimize o bloqueio com BSA a 5%.
• Para ELISA, revesta com proteína recombinante ou lisado celular a 1–2 µg/mL; verifique a reatividade cruzada contra cadeias beta HLA-DR relacionadas.
• Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento e utilize misturas frescas de inibidores de protease para manter a integridade do antígeno.
• Combine com um anticorpo secundário apropriado e considere titular o anticorpo primário (por exemplo, 1:500–1:2000 para WB) para minimizar o background.

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