Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-HLA-DRB4 para WB e ELISA - P13762

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DRB4

• Atua como a cadeia beta das moléculas MHC classe II DR, desempenhando um papel central no sistema imunológico adaptativo ao ligar peptídeos de fontes endocitadas ou autofágicas e apresentá-los a células T auxiliares CD4+.
• A fenda de ligação de peptídeos acomoda peptídeos de 10–30 resíduos derivados principalmente de proteínas degradadas na via endossomal/ lisossomal de células apresentadoras de antígenos (APCs), como células dendríticas, macrófagos e células B.
• A montagem começa no retículo endoplasmático formando um heterononâmero com CD74 (cadeia invariante), que direciona o complexo para compartimentos de processamento de antígenos e impede a ligação prematura de peptídeos.
• Em endossomos tardios/lisossomos, o CD74 é clivado sequencialmente por catepsinas, e o fragmento CLIP residual é trocado por peptídeos antigênicos de alta afinidade através da ação do HLA‑DM; em células B e células dendríticas, o HLA‑DO modula essa troca.
• Expresso constitutivamente em APCs profissionais e também encontrado em células epiteliais gastrointestinais, onde contribui para a vigilância imunológica local e tolerância oral.
• Passa por múltiplos compartimentos de membrana, incluindo a membrana celular, retículo endoplasmático, rede de Golgi, endossomos, lisossomos e endossomos tardios.
• Modificações pós‑traducionais incluem glicosilação N‑ligada, ligações dissulfeto, ligações isopeptídicas e potencial ubiquitinação — tudo isso influencia a estabilidade, conformação e tráfego da proteína.
• Altamente polimórfico e implicado na imunologia do transplante; incompatibilidades no HLA‑DR do doador e do receptor podem desencadear respostas de células T alorreativas.

Orientacão Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético mapeado para os aminoácidos 50–150 dentro do domínio extracelular; para aplicações que requerem conformação nativa (ex.: citometria de fluxo), verifique se o epítopo está acessível em células vivas.
• Aplicações recomendadas incluem Western blot (WB) e ELISA; a detecção típica por WB produz uma banda próxima a 30 kDa. Otimize as diluições do anticorpo usando lisados celulares humanos apropriados, como as linhagens de células B Raji ou Daudi.
• A reatividade cruzada é demonstrada para humano; a reatividade com ortólogos em outras espécies não foi caracterizada e deve ser testada individualmente.
• A homologia genética entre os genes DRB pode levar a reconhecimento cruzado; empregue controles de knockdown por siRNA ou knockout baseado em CRISPR se a discriminação específica de isoforma for crítica para o seu estudo.
• Siga as condições padrão de envio e armazenamento: mantenha em sacos de gelo, alíquote após o recebimento e evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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