Anti-HMGB1 Anticorpo Monoclonal de Coelho (Validado por KO) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09429

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína B1 de Alta Mobilidade (HMGB1)

• HMGB1 (proteína B1 de alta mobilidade, também conhecida como HMG-1) é uma proteína multifuncional sensível a redox que atua como uma chaperona de DNA no núcleo, onde participa de replicação, transcrição, remodelagem da cromatina, recombinação V(D)J, reparo de DNA e estabilidade genômica. (PubMed:33147444) Referências relacionadas: PMID:33147444
• Funciona como um padrão molecular associado a perigos (DAMP) quando liberado extracelularmente, mediando respostas inflamatórias e imunes ao se ligar a receptores como RAGE, TLR2 e TLR4. (PubMed:27362237, PubMed:34743181) Referências relacionadas: PMID:27362237 PMID:34743181
• A atividade do HMGB1 é ditada pelo seu estado redox: a forma totalmente reduzida atua como quimiocina, a forma dissulfeto como citocina e a forma sulfonila promove tolerância imunológica. (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764) Referências relacionadas: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764
• A localização subcelular do HMGB1 é dinâmica e inclui o núcleo, cromossomo, citoplasma, membrana celular, endossomo, retículo endoplasmático e formas secretadas.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação, ADP-ribosilação, fosforilação e oxidação, regulam a distribuição subcelular e as atividades funcionais do HMGB1.
• O HMGB1 é expresso de forma ubíqua, com expressão confirmada em plaquetas. (PubMed:11154118) Referências relacionadas: PMID:11154118
• A proteína desempenha um papel nas interações hospedeiro-vírus, sendo crítica para a entrada do SARS-CoV-2 e SARS-CoV, e facilitando a replicação do vírus influenza A, EBV e dengue. (PubMed:33147444, PubMed:35239449) Referências relacionadas: PMID:33147444 PMID:35239449

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 100–200 do HMGB1 humano. Considere usar a proteína recombinante de comprimento total ou mapeamento de epítopos para confirmar a especificidade de detecção.
• Para Western blotting, o HMGB1 tem um peso molecular previsto de ~25 kDa; múltiplas bandas podem aparecer devido a modificações pós-traducionais ou estados redox.
• Em IHC-P, otimize os métodos de recuperação de antígeno e valide usando tecidos com padrões de expressão conhecidos de HMGB1 (por exemplo, amígdala, fígado). Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Em IF/ICC, note que o HMGB1 pode transitar entre o núcleo e o citoplasma dependendo do estresse celular. Trate as células com estímulos como LPS ou TNF-α para avaliar a translocação.
• Para ELISA, certifique-se de que o par de anticorpos seja validado para o formato de ensaio escolhido; a região do epítopo (100–200) deve estar acessível na preparação do antígeno alvo.

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