Anticorpo Policlonais Anti-HMGCL para WB, IHC-P, ELISA - P35914

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HMGCL

• HMGCL (Hidroximetilglutaril-CoA liase, mitocondrial) é uma enzima chave na cetogênese e no catabolismo da leucina, catalisando a clivagem de (S)-3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA em acetil-CoA e acetoacetato.
• Se localiza principalmente na matriz mitocondrial e também é encontrado em peroxissomos, consistente com seu papel no metabolismo lipídico.
• A enzima tem a maior expressão no fígado, com expressão adicional em pâncreas, rim, intestino, testículo, fibroblastos e linfoblastos; expressão muito baixa no cérebro e músculo esquelético.
• Uma isoforma de splicing alternativo (isoforma 2) apresenta maior expressão relativa de mRNA no coração (30%), músculo esquelético (22%) e cérebro (14%).
• HMGCL é uma liase de ligação a metais; sua atividade depende de cátions bivalentes, e pertence à família das HMG-CoA liases.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e formação de pontes dissulfeto, que podem regular sua função ou estabilidade.
• Mutações no HMGCL estão ligadas à deficiência de 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA liase, um raro distúrbio metabólico autossômico recessivo.
• Corpos cetônicos produzidos por essa via servem como fonte alternativa de energia para a glicose, especialmente durante o jejum, e atuam como precursores lipídicos e reguladores metabólicos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a sequência completa do HMGCL humano (aa 1-325), portanto espera-se que o anticorpo reconheça a proteína nativa em condições desnaturantes e nativas.
• Para Western blot, é esperada uma banda de aproximadamente 34 kDa; considere usar condições redutoras e valide com um controle positivo, como lisado de fígado.
• Em IHC-P, espere coloração mitocondrial em tecidos com alta expressão de HMGCL (ex.: fígado); um método apropriado de recuperação de antígeno pode ser necessário.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com camundongo e rato; ao usar essas espécies, valide a especificidade no sistema de tecido ou celular relevante.
• Para ELISA, considere a adsorção do imunógeno recombinante ou de um peptídeo e otimize as condições do ensaio empiricamente.

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