Anticorpo Policlonico Anti-HNF4A para WB e ELISA - P41235

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fator Nuclear 4-alfa Hepático

• HNF4A, também conhecido como membro 1 da subfamília 2 grupo A do receptor nuclear (NR2A1) e fator de transcrição 14 (TCF14), é um membro da família dos receptores nucleares que funciona como um fator de transcrição ativado por ligante.
• No fígado, o HNF4A controla a expressão de genes hepáticos durante a diferenciação de células progenitoras endodérmicas em hepáticas, facilitando o recrutamento da RNA polimerase II aos promotores alvo. Referências relacionadas: PMID:30597922
• Ele reprime o complexo transcricional CLOCK-BMAL1 e é essencial para a manutenção do ritmo circadiano e a regulação do período em células do fígado e cólon. Referências relacionadas: PMID:30530698
• O HNF4A se localiza exclusivamente no núcleo, onde se liga ao DNA em elementos de resposta específicos.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação tipo ubiquitinação, modulam sua atividade transcricional e estabilidade proteica.
• Mutações no gene HNF4A estão associadas à diabetes de início na juventude com maturidade tipo 1 (MODY1) e outros distúrbios metabólicos, destacando seu papel na homeostase da glicose.
• O uso de promotores alternativos e o splicing geram múltiplas isoformas (ex.: HNF4a7, HNF4a8, HNF4a9), que podem ter funções específicas de tecido.
• A proteína contém domínios conservados de dedo de zinco para ligação ao DNA e um domínio de ligação a ligante característico dos receptores nucleares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente a uma sequência dentro dos aminoácidos 226–325 do HNF4A humano. Considere verificar a reatividade da isoforma se estiver visando variantes de splicing específicas.
• Para Western blotting, o peso proteico previsto é de 53 kDa. O uso de extratos nucleares de tecido/células de fígado ou cólon humano pode melhorar o sinal.
• Confirme a especificidade por meio de experimentos de knockdown ou superexpressão, e inclua controles positivos e negativos adequados.
• No ELISA, o peptídeo imunógeno pode servir como controle positivo; teste contra a proteína recombinante de comprimento total para validar a ligação.
• Anticorpos policlonais podem apresentar variação entre lotes; re-estandarize seu protocolo ao usar uma nova batelada.

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