Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-hnRNP U para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q00839

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da hnRNP U

• A hnRNP U é uma proteína multifuncional de ligação a DNA e RNA que organiza a arquitetura da cromatina ligando-se a RNAs associados à cromatina (caRNAs) e elementos da região de ancoragem ao andaime/matriz (S/MAR), essencial para manter a estabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:1324173, PMID:8174554, PMID:10671544, PMID:11003645, PMID:11909954, PMID:28622508
• Atua como um regulador transcricional promovendo o recrutamento do complexo de pré-iniciação através da interação com o TFIIH, enquanto também inibe o alongamento bloqueando a fosforilação do CTD da RNA Pol II. Referências relacionadas: PMID:10490622, PMID:15711563
• A hnRNP U é crucial para a inativação do cromossomo X ao ligar-se diretamente e ancorar o RNA longo não codificante Xist ao cromossomo X inativo.
• A proteína modula o splicing alternativo regulando a biogênese do snRNP U2 e ligando-se a regiões ricas em G/U em pré-mRNAs, incluindo SMN1/2. Referências relacionadas: PMID:22325991
• Regula a estabilidade do mRNA, aumentando a expressão de alvos como MYC e TNFA através de interações com o complexo mediado por CRD e 3'-UTRs. Referências relacionadas: PMID:17174306, PMID:17289661, PMID:19029303
• Durante a mitose, a fosforilação em Ser-59 pela PLK1 é necessária para o alinhamento e segregação cromossômica adequados, e contribui para a organização do fuso. Referências relacionadas: PMID:21242313, PMID:25986610
• A hnRNP U é predominantemente nuclear, mas também se localiza em estruturas do citoesqueleto, incluindo centrossomos, cinetócoros, polos do fuso e corpo intermediário durante a divisão celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado o desenho do imunógeno (fragmento C-terminal, a.a. 608-825), espera-se que este anticorpo policlonal detecte a hnRNP U de comprimento total, bem como possíveis variantes de splicing contendo esta região.
• Para Western blotting, uma banda de ~91 kDa é esperada; use extratos de células inteiras ou nucleares de tecidos/células humanas, de camundongo ou rato como controles positivos.
• Ao realizar imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar a arquitetura nuclear, pois a hnRNP U exibe localização tanto nuclear quanto no aparelho mitótico.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação antigênica pode ser necessária; valide com amostras de tecido positivas e negativas conhecidas.
• Para imunoprecipitação (IP), considere usar lisados nucleares e valide os ácidos nucleicos ou parceiros proteicos co-precipitados se estiver estudando interações cromatina/RNA.
• A reatividade cruzada de espécies com camundongo e rato foi relatada, mas sempre verifique a reatividade em seu sistema de amostra específico.

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