Anti-HNRNPD Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14103

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HNRNPD

• O HNRNPD, também conhecido como AUF1, é uma ribonucleoproteína nuclear heterogênea que se liga especificamente a elementos ricos em AU (AREs) na região 3'-UTR de muitos mRNAs lábeis, como proto-oncogenes e citocinas, para regular a estabilidade e a renovação do mRNA.
• Atua não apenas no metabolismo de RNA, mas também como um fator de transcrição ao ligar-se ao DNA de fita dupla e simples, possivelmente influenciando a manutenção do telômero através da interação com repetições TTAGGG.
• A proteína contém dois motivos de reconhecimento de RNA (RRMs) que reconhecem o motivo 5'-UUAG-3' no RNA e podem ligar-se tanto ao RNA quanto ao DNA telomérico de fita simples, sendo que o RRM1 inibe a formação de quadruplex de DNA.
• O HNRNPD está implicado em processos citoplasmáticos de desadenilação/degradação, incluindo a degradação do mRNA de FOS mediada pelo principal determinante de instabilidade da região codificadora, e pode facilitar a renovação de mRNA acoplada à tradução.
• Desempenha um papel no relógio circadiano ao ligar-se diretamente ao 3'UTR do mRNA de CRY1 e aumentar sua tradução rítmica, e também pode modular a tradução de PER2.
• Múltiplas isoformas são geradas através de splicing alternativo, dando origem a variantes como p37, p40, p42 e p45, que exibem atividades diferentes na degradação de mRNA.
• A proteína transita entre o núcleo e o citoplasma, sendo que sua localização subcelular afeta seu papel funcional no processamento e degradação de RNA.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, metilação, fosforilação e ubiquitinação, que podem modular sua afinidade de ligação e distribuição subcelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína recombinante correspondente aos aminoácidos 1-306 do HNRNPD humano (comprimento total), portanto, espera-se que o anticorpo reconheça tanto os pools nucleares quanto citoplasmáticos, bem como as principais isoformas.
• Para o western blot (WB), uma banda esperada em torno de 38 kDa é detectada em lisados de humanos, camundongos e ratos; no entanto, os padrões específicos de isoformas podem variar, por isso a validação em seu sistema experimental específico é aconselhada.
• Este anticorpo policlonal pode ser aplicado em imuno-histoquímica (IHC-P), imunofluorescência (IF/ICC) e ELISA; considere otimizar as condições de fixação/permeabilização para IF para preservar a acessibilidade do epítopo.
• Ao estudar a expressão relacionada ao ritmo circadiano, a amostragem em série temporal e controles positivos apropriados (por exemplo, linhagens celulares sincronizadas) são recomendados para capturar mudanças rítmicas.

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