Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Homer1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q86YM7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Homer1

• Homer1 é uma proteína de andaime da densidade pós-sináptica codificada pelo gene HOMER1. Múltiplos isoformas (por exemplo, isoformas 1 e 3) são produzidas por splicing alternativo, com a isoforma 3 atuando como um regulador negativo dominante.
• Ela liga e interliga receptores metabotrópicos de glutamato do grupo I (GRM1 e GRM5) com proteínas intracelulares como ITPR1, SHANK1 e SHANK3, acoplando a ativação do receptor de superfície à liberação intracelular de cálcio do retículo endoplasmático.
• A isoforma 1 regula o tráfego e a expressão na superfície do GRM5, enquanto a isoforma 3 compete dinamicamente com a isoforma 1 para ajustar finamente a função metabotrópica do glutamato sináptico e participa de mudanças estruturais durante a plasticidade neuronal duradoura e o desenvolvimento.
• Por meio de sua associação com SHANK1, a Homer1 forma um complexo de alta ordem crítico para a integridade estrutural e funcional dos espinhos dendríticos (Por similaridade).
• Além do sistema nervoso, a Homer1 regula negativamente a ativação de células T inibindo a via calcineurina-NFAT, competindo com a calcineurina pela ligação à proteína NFAT e impedindo a desfosforilação e ativação do NFAT. Referências relacionadas: PMID:18218901
• Subcelularmente, a Homer1 está predominantemente localizada no citoplasma, na densidade pós-sináptica, nas sinapses excitatórias e nos espinhos dendríticos dos neurônios.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, como acetilação e fosforilação, e contém um domínio de hélice-coiled-coil importante para multimerização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 170–354, uma região que pode incluir sequências de hélice-coiled-coil ou de ligação; o anticorpo pode reconhecer todas as isoformas da Homer1 que compartilham este epítopo.
• Para Western blot, use condições redutoras e um controle positivo adequado, como lisado de cérebro humano ou de rato; o tamanho esperado da banda é de aproximadamente 40 kDa, embora a migração específica da isoforma possa variar.
• Em imunofluorescência e imuno-histoquímica, otimize os protocolos de fixação/permeabilização e, para secções de parafina, determine as condições apropriadas de recuperação antigênica para preservar a acessibilidade do epítopo.
• Considere verificar a especificidade da isoforma via knockdown por siRNA ou construções específicas da isoforma, se for necessária a discriminação entre Homer1A, Homer1B e Homer1C.
• O desempenho do anticorpo em ELISA pode ser avaliado usando proteína Homer1 recombinante ou lisados celulares, com atenção à composição do tampão de bloqueio e lavagem para reduzir a ligação inespecífica.

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