Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-HPRT1 para WB e ELISA - P00492

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HPRT1

• A hipoxantina-guanina fosforribosiltransferase (HPRT1) catalisa a conversão de hipoxantina em IMP e guanina em GMP via via de salvamento de purinas, reciclando bases de purina em nucleotídeos.
• A HPRT1 transfere o grupo 5-fosforribosil do 5-fosforribosilpirofosfato (PRPP) para bases de purina, desempenhando um papel central na geração de nucleotídeos de purina para síntese de ácidos nucleicos e energética celular.
• A HPRT1 é um membro da família de fosforribosiltransferases de purina/pirimidina, conservada entre espécies, e é codificada pelo gene HPRT1 (HGPRT) no cromossomo X.
• Subcelularmente, a HPRT1 está principalmente localizada no citoplasma, onde acessa seus substratos para reações de salvamento.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e formação de ligação isopeptídica (ubiquitinação), que podem regular sua atividade ou estabilidade.
• Mutações no HPRT1 causam a síndrome de Lesch-Nyhan, um distúrbio neurológico grave, e estão associadas à gota devido à superprodução de purinas por deficiência no salvamento.
• A enzima requer magnésio como cofator e liga nucleotídeos, refletindo seu papel na transferência de fosforribosil.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O desenho do imunógeno baseado em uma região central da HPRT1 (aa 119-218) pode fornecer especificidade para o alvo, evitando a variabilidade do terminal N ou C. Considere testar em espécies relevantes (humano, camundongo, rato) devido à alta conservação da sequência.
• Para Western blot, a banda esperada é de aproximadamente 25 kDa; use marcadores de peso molecular apropriados. Se a validação de nocaute for necessária, inclua lisados de células KO de HPRT1 para confirmar a especificidade.
• No ELISA, um ensaio indireto padrão pode ser empregado com o peptídeo ou proteína HPRT1 recombinante; considere a otimização das condições de revestimento e diluição do anticorpo.
• Como a HPRT1 é ubíqua, confirme a expressão em seu tipo de amostra; pode servir como controle de carga em alguns experimentos.
• A reatividade cruzada com HPRT1 de camundongo e rato permite estudos translacionais; valide no sistema de modelo desejado.

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