Anticorpo Policlonais Anti-HR para WB e ELISA - O43593

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HR

• A HR (Hairless) é uma histona desmetilase específica de lisina, também conhecida pelos apelidos AU, MUHH, ALUNC, HYPT4, MUHH1 e HSA277165, codificada pelo gene HR.
• Ela desmetila especificamente a lisina 9 mono e dimetilada da histona H3 (H3K9me1/me2), regulando assim a estrutura da cromatina e a transcrição gênica.
• A HR atua como um regulador de transcrição essencial para a biologia capilar, provavelmente por meio do direcionamento de genes de colágeno, e também modula a atividade neural e o progresso do ciclo celular.
• A proteína está localizada no núcleo, o que é consistente com seu papel na modificação de histonas e na transcrição.
• A isoforma 1 e a isoforma 2 apresentam maior expressão no intestino delgado; a isoforma 2 é fortemente expressa na pele, enquanto a isoforma 1 é fracamente expressa no cérebro e no cólon, com quantidades traço em outros tecidos.
• A HR contém domínios de dedo de zinco e depende de ferro como cofator para sua atividade desmetilase, classificando-a na família das desmetilases que contêm o domínio JmjC.
• Modificações pós-traducionais e splicing alternativo geram múltiplas isoformas; mutações no gene HR estão associadas ao fenótipo da doença de hipotricose.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que compreende os aminoácidos 200–480 da HR humana, o que pode gerar anticorpos que reconhecem múltiplas isoformas da HR se as sequências do epitopo forem conservadas.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto da HR é de ~127 kDa; use um gel SDS-PAGE padrão com porcentagem de acrilamida apropriada (ex: 8–10%) e protocolos padrão de transferência úmida ou semi-seca para proteínas de alto peso molecular.
• Para aplicações de ELISA, otimize a concentração de recobrimento do antígeno e use uma etapa de bloqueio com leite desnatado ou BSA para reduzir o ruído de fundo.
• Como a HR é expressa na pele e no intestino delgado, esses tecidos podem servir como controles positivos; valide a especificidade do anticorpo incluindo lisados de linhagens celulares ou tecidos que expressam HR e considere o uso de linhagens celulares knockout, se disponíveis.

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