Anticorpo Policlonal Anti-HSD3B1 para WB, IF-P, ELISA - P14060

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HSD3B1

• HSD3B1 é uma enzima bifuncional pertencente à família 3-beta hidroxiesteroide desidrogenase/ isomerase. Ela catalisa a oxidação e isomerização de precursores 3β-hidroxi-Δ5-esteroides para 3-oxo-Δ4-esteroides, um passo essencial na biossíntese de todos os principais hormônios esteroides. Isso inclui a conversão de pregnenolona em progesterona, 17α-hidroxipregnenolona em 17α-hidroxiprogesterona, desidroepiandrosterona (DHEA) em 4-androstenediona e androstenediol em testosterona. Referências relacionadas: PMID:1401999 PMID:2139411
• Além da esteroidogênese de novo, a HSD3B1 regula a biodisponibilidade local de andrógenos por meio da interconversão de andrógenos 5α-reduzidos ativos e inativos. Ela inativa eficientemente a di-hidrotestosterona (DHT) convertendo-a em 5α-androstanediol, um metabólito que não se liga ao receptor de andrógeno. Referências relacionadas: PMID:1401999 PMID:2139411
• HSD3B1 está ancorada a membranas intracelulares via uma hélice transmembrana de passagem única e localiza-se tanto na membrana do retículo endoplasmático quanto na membrana mitocondrial.
• A enzima é expressa predominantemente na placenta e na pele, e também é encontrada em níveis significativos no tecido mamário.
• É classificada sob múltiplas palavras-chave funcionais, incluindo enzima multifuncional, oxidorredutase dependente de NAD/NADP, isomerase, metabolismo de esteroides e metabolismo lipídico, destacando seu papel central nas vias esteroidogênicas e metabólicas.
• De acordo com a UniProt, espera-se que a HSD3B1 use NAD+ como o doador de elétrons preferido para sua atividade desidrogenase e NADPH para a atividade redutase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à proteína HSD3B1 humana de comprimento total (aminoácidos 1-290), o que pode gerar uma resposta policlonal direcionada a múltiplos epítopos. Para Western blot, considere usar lisados de controle positivo de tecido placentário ou mamário, ou linhagens celulares com alta expressão endógena de HSD3B1 (por exemplo, células de câncer de mama ou próstata).
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 42 kDa. Devido à sua localização na membrana, garanta solubilização suficiente usando tampões de lise apropriados contendo detergentes (por exemplo, tampão RIPA) e evite ferver as amostras em temperaturas excessivamente altas para prevenir agregação.
• Para imunofluorescência (IF-P), inclua uma etapa de permeabilização (por exemplo, 0,1% Triton X-100) para permitir o acesso do anticorpo aos compartimentos de membrana intracelular. A coloração conjunta com marcadores de RE ou mitocôndria pode validar a localização subcelular esperada.
• O anticorpo tem reatividade cruzada confirmada com amostras humanas, de camundongo e de rato. Verifique a adequação para outras espécies verificando a homologia da sequência e realizando um experimento piloto.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar. Considere o armazenamento em alíquotas e testes de gradiente ao otimizar para novos ensaios, e valide o desempenho em seu próprio sistema de amostras.

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