Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-HSD3B2 para WB, IF/ICC, ELISA - P26439

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HSD3B2

• O HSD3B2 (3-beta-HSD II) é codificado pelo gene HSD3B2 e pertence à família das 3-beta-hidroxiesteroide desidrogenases/isomerases. É predominantemente expresso na glândula adrenal, testículo e ovário, onde catalisa uma etapa chave na biossíntese de hormônios esteroides.
• A enzima funciona como um catalisador bifuncional: oxida os esteroides Delta(5)-eno-3-beta-hidroxi para esteroides Delta(4)-eno-3-ceto e, em seguida, isomeriza-os para esteroides hormonais ativos. Esta atividade é essencial para a produção de progesterona, glicocorticoides, mineralocorticoides e esteroides sexuais.
• O HSD3B2 está localizado tanto na membrana do retículo endoplasmático quanto na membrana mitocondrial, com domínios transmembrana que o ancoram a esses orgânulos. Esta localização dupla apoia seu papel em múltiplas etapas da esteroidogênese.
• Significado clínico: Mutações no HSD3B2 estão associadas à hiperplasia adrenal congênita (CAH), um distúrbio caracterizado pela síntese prejudicada de cortisol e aldosterona, levando à insuficiência adrenal e graus variáveis de ambiguidade sexual.
• O imunógeno do anticorpo cobre os aminoácidos 1-287 da proteína de comprimento total (sequência de referência NP_000189.1), que abrange o domínio catalítico, garantindo o reconhecimento da enzima nativa em amostras humanas e de camundongo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 42 kDa em lisados de linhagens celulares ou tecidos de adrenal, testículo ou ovário humanos. Amostras de camundongo com expressão confirmada também podem ser usadas, mas a reatividade do anticorpo em camundongos deve ser validada em seu sistema específico.
• Na imunofluorescência/ICC, antecipe padrões de coloração consistentes com a localização no retículo endoplasmático e mitocondrial. Use marcadores específicos de orgânulos e métodos de permeabilização apropriados para ajudar a confirmar a distribuição subcelular.
• Como um anticorpo policlonal, ele pode fornecer um sinal mais forte devido ao reconhecimento de múltiplos epítopos, mas a variabilidade lote a lote pode ocorrer. Considere incluir um controle positivo conhecido (por exemplo, proteína HSD3B2 recombinante) em cada experimento.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção, mas as diluições ideais e as condições de emparelhamento devem ser determinadas empiricamente.

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