Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-HSF1 para WB, IHC-P, ELISA - Q00613

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HSF1

• HSF1 é um fator de transcrição induzível por estresse que regula a resposta ao choque térmico (HSR) ao direcionar a expressão de chaperonas moleculares e proteínas de choque térmico (HSPs) (PubMed:11447121, PubMed:12659875, PubMed:12917326).
  Referências relacionadas: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326
• Em células não estressadas, o HSF1 é mantido como um monômero inativo em um complexo com HSP90; sob estresse, ele homotrimeriza, transloca para o núcleo e ativa a transcrição (PubMed:11583998, PubMed:16278218, PubMed:9727490).
  Referências relacionadas: PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490
• HSF1 se liga a sequências de DNA pentâmero invertidas 5'-NGAAN-3' e associa-se à cromatina nos promotores de genes de choque térmico para direcionar a expressão gênica (PubMed:1986252, PubMed:26727489, PubMed:25963659).
  Referências relacionadas: PMID:1986252, PMID:26727489, PMID:25963659
• Além da transcrição, o HSF1 participa no processamento de mRNA e na exportação nuclear de transcritos de HSP70, e regula a progressão mitótica e o reparo de danos no DNA via repressão da junção de extremidades não homólogas (NHEJ) (PubMed:14707147, PubMed:17897941, PubMed:18794143, PubMed:26359349).
  Referências relacionadas: PMID:14707147, PMID:17897941, PMID:18794143, PMID:26359349
• HSF1 está sujeito a extensas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade e estabilidade.
• Na infecção por HIV-1, o HSF1 pode reativar a transcrição viral latente ao se ligar ao LTR e recrutar fatores de elongação CDK9 e CCNT1.
• HSF1 localiza-se dinamicamente no núcleo, citoplasma, polo do fuso, centrossomo e cinetocoro, refletindo suas diversas funções celulares.
• O gene HSF1 humano (GeneID: 3297) produz múltiplos isoformas via splicing alternativo; a forma predominante migra em ~57 kDa, e um isoforma alternativo é observado em ~52 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 367-529) tem como alvo a região C-terminal do HSF1, que inclui domínios de transativação e regulatórios, garantindo o reconhecimento da forma de comprimento total e de possíveis isoformas.
• Para WB, espere bandas próximas a 52–57 kDa; considere usar lisados de células HeLa ou Jurkat submetidas a choque térmico como controles positivos, e valide com linhagens celulares de knockdown ou negativas.
• Em experimentos de IHC-P, otimize a recuperação de antígeno (ex.: tampão citrato pH 6.0) e valide os padrões de coloração em tecidos conhecidos por expressar HSF1 (ex.: testículo) ou amostras estressadas por calor.
• Para ELISA, use proteína HSF1 recombinante para confirmar a ligação do anticorpo e determinar a concentração de trabalho ideal através de titulação em tabuleiro de xadrez.

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