Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-HSF1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q00613

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HSF1

• HSF1 (fator de proteína de choque térmico 1), também conhecida como HSTF1, é um fator de transcrição induzível por estresse fundamental na resposta ao choque térmico, promovendo a expressão de proteínas de choque térmico (HSPs) para proteger as células do estresse proteotóxico. Referências relacionadas: PMID:11447121 PMID:12659875 PMID:12917326
• Na ausência de estresse, a HSF1 é mantida em estado monomérico inativo por meio da interação com um complexo multichaperone contendo HSP90. Após o choque térmico, ela sofre homotrimerização, se liga aos elementos de choque térmico (HSEs) no DNA e ativa a transcrição do gene HSP. Referências relacionadas: PMID:9727490 PMID:11583998 PMID:16278218 PMID:10359787
• A HSF1 reconhece sequências pentâméricas invertidas 5'-NGAAN-3' e se localiza na cromatina nos promotores de genes de choque térmico, formando um complexo com TTC5 e p300 para estimular a transcrição. Referências relacionadas: PMID:1986252 PMID:26727489 PMID:25963659 PMID:18451878
• Além da ativação transcricional, a HSF1 modula processos pós-transcricionais: ela regula positivamente o processamento da extremidade 3' do pré-mRNA/poliadenilação e a exportação nuclear do mRNA HSP70, em parte via simplequina (SYMPK). Referências relacionadas: PMID:14707147 PMID:17897941
• A HSF1 exibe funções independentes da transcrição, incluindo a repressão da expressão de c-fos induzida por Ras, a regulação da progressão mitótica e o controle negativo do reparo de DNA por junção não homóloga de extremidades (NHEJ). Referências relacionadas: PMID:9341107 PMID:18794143 PMID:26359349
• Subcelularmente, a HSF1 é detectada no núcleo, nucleoplasma, citoplasma, região perinuclear, polo do fuso, centrômero e cinetocoro, refletindo seus papéis multifacetados.
• Modificações pós-traducionais como fosforilação e acetilação ajustam finamente a atividade da HSF1, enquanto sua interação com elementos virais, como o LTR do HIV-1, destaca seu papel nas interações hospedeiro-patógeno.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 350‑529) tem como alvo a porção C-terminal da HSF1, que é menos conservada que o domínio de ligação ao DNA; confirme a especificidade usando lisados de células submetidas a choque térmico versus células não tratadas.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 57 kDa; inclua um controle positivo de choque térmico (por exemplo, células HeLa tratadas a 42°C por 1 hora) e um controle de carregamento.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de recuperação de antígeno e fixação; a localização nuclear da HSF1 aumenta após o estresse, portanto, considere comparar secções de tecido estressadas e não estressadas.
• Como um anticorpo policloonal, a consistência entre lotes pode variar; faça a titulação para cada aplicação e execute controles adequados, especialmente ao mudar para um novo lote.

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