Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-HSP40 para WB, FC, ELISA - P25685

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HSP40/DNAJB1

• Identidade proteica: DNAJB1 (também conhecido como HSP40, Hdj1, HDJ-1) é uma chaperona molecular humana pertencente à família DnaJ/HSP40, com duas isoformas produzidas por splicing alternativo.
• Atividade de co-chaperona HSP70: Liga-se a proteínas HSP70 e estimula sua atividade ATPase, essencial para o dobramento de proteínas e prevenção de agregação.
• Função adaptadora de chaperona: Junto com TTC1, atua como um adaptador de chaperona que regula o dobramento dependente de HSP70 interagindo com a região amino-terminal da HSP70 (PubMed:14503850).
  Referências relacionadas:
  PMID:14503850
• Regulação da resposta ao choque térmico: Regula negativamente a atividade transcricional do HSF1 induzida por choque térmico durante a fase de atenuação e recuperação, modulando a resposta ao estresse celular (PubMed:9499401).
  Referências relacionadas:
  PMID:9499401
• Estabilização do complexo HSC70-HIP: DNAJB1 estimula a associação entre a chaperona constitutiva HSC70 e a co-chaperona HIP, melhorando o controle de qualidade das proteínas.
• Hidrólise de ATP e catálise de dobramento: In vitro, estimula a hidrólise de ATP e o dobramento de proteínas desdobradas mediado por HSPA1A/B (HSP70-1), demonstrando atividade chaperona direta (PubMed:24318877).
  Referências relacionadas:
  PMID:24318877
• Localização subcelular: A proteína é encontrada no citoplasma, núcleo e nucléolo, deslocando-se entre esses compartimentos em condições normais e de estresse.
• Modificações pós-traducionais: É uma fosfoproteína, e sua atividade pode ser regulada por fosforilação; dados adicionais de proteômica confirmam sua identidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Design do imunogênio: O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético dentro dos aminoácidos 241–340 do DNAJB1 humano, uma região provavelmente exposta na proteína nativa e conservada entre humano, rato e rato, consistente com a reatividade cruzada observada.
• Western blotting (WB): Para WB, use lisados celulares com choque térmico ou induzidos por estresse como controles positivos; espere bandas próximas a 27 kDa e 38 kDa (correspondendo a diferentes isoformas ou modificações). Otimize a carga e os anticorpos de detecção com base em sua amostra.
• Citometria de fluxo (intracelular): Para FC intracelular, são necessários permeabilização e fixação para detectar HSP40 citoplasmático e nuclear; valide a coloração com células com choque térmico versus células não tratadas.
• Aplicações de ELISA: Este anticorpo monoclonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção em ELISA sanduíche; o pareamento apropriado com um anticorpo de detecção (por exemplo, um anti-HSP40 policlonal) deve ser testado.

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