Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-HSP70/HSPA1A para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P0DMV8/P0DMV9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de HSP70/HSPA1A

• HSPA1A (Heat Shock 70 kDa Protein 1A) é um membro canônico da família HSP70 de chaperonas moleculares, essencial para a homeostase proteica sob condições normais e de estresse (UniProt).
• Atua como uma chaperona dependente de ATP: ela cicla entre os estados ligados a ATP (baixa afinidade por substrato) e ligados a ADP (alta afinidade por substrato), facilitando a ligação e liberação de substratos, com co-chaperonas do domínio J (HSP40s) estimulando a atividade ATPase e fatores de troca de nucleotídeos (família BAG) promovendo a liberação de ADP. Referências relacionadas: PMID:24012426 PMID:24318877 PMID:26865365
• Regula a triagem de proteínas: seu status de acetilação determina se ele promove o re-dobramento via HOPX ou a degradação mediada por ubiquitina via STUB1/CHIP, equilibrando assim o controle de qualidade do proteoma. Referências relacionadas: PMID:27708256
• Se localiza principalmente no citoplasma e no núcleo, mas também se associa ao centrossomo durante a mitose, onde é necessário para a integridade do polo do fuso e a montagem do fuso bipolar. Referências relacionadas: PMID:27137183
• Regula vias de sinalização chave: aumenta a ubiquitinação mediada por STUB1 e a degradação de SMAD3 (inibindo a sinalização TGF-β) e FOXP3 (em células T reguladoras durante a inflamação). Referências relacionadas: PMID:24613385 PMID:23973223
• Participa da eliminação de fatores de transcrição mal dobrados, como PRDM1/Blimp‑1, retendo-os no citoplasma e direcionando-os para degradação proteassômica. Referências relacionadas: PMID:28842558
• Regula negativamente a atividade transcricional de HSF1 durante a fase de recuperação da resposta ao choque térmico, contribuindo para a atenuação da resposta ao estresse. Referências relacionadas: PMID:9499401
• Pode ser secretado para o exterior celular e, em certos contextos patológicos, serve como receptor celular do hospedeiro para a entrada do rotavírus A. (SWISS-PROT)

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência dentro dos aminoácidos 500-600 de HSPA1A humano, uma região altamente conservada entre humano, camundongo e rato; portanto, espera-se uma ampla reatividade cruzada, mas os usuários devem validar o desempenho em seu sistema de amostra específico.
• Para Western blot, uma banda de ~70 kDa é observada; inclua sempre controles positivos (por exemplo, lisado de HeLa submetido a choque térmico) e negativos apropriados, e considere o uso de uma proteína de manutenção para normalização.
• Para imunofluorescência e imunohistoquímica, otimize as condições de fixação e permeabilização, pois HSP70 pode estar presente nos compartimentos citoplasmático e nuclear; a recuperação de antígeno pode ser necessária para cortes incluídos em parafina fixados em formalina.
• Ao usar em ELISA, certifique-se de que o tampão de revestimento e as condições de bloqueio são compatíveis com anticorpos policlonados para minimizar a ligação não específica.
• Este anticorpo foi relatado para uso em Western blot, imunofluorescência/imunocitoquímica, imunohistoquímica (parafina) e ELISA; para outras aplicações, pode ser necessária otimização adicional.

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