Anticorpo Monoclonal Anti-CD116 Humano para Citometria de Fluxo - P15509

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD116

• O CD116, a subunidade alfa do receptor do fator estimulador de colônias de granulócitos e macrófagos (CSF2RA, também conhecido como CDw116), é um receptor de baixa afinidade para o GM-CSF que media a proliferação, diferenciação e ativação de células hematopoiéticas.
• É uma proteína de membrana tipo I de passagem única que transduz sinais induzidos por ligante através da associação com a cadeia beta comum (CSF2RB) para formar o complexo receptor de alta afinidade.
• O receptor localiza-se principalmente na membrana celular, com isoformas solúveis geradas por splicing alternativo e liberação proteolítica; também é anotado como secretado.
• Múltiplas isoformas proteicas surgem de splicing alternativo e glicosilação diferencial, contribuindo para a faixa de peso molecular observada de 26 kDa a 49 kDa.
• O CD116 contém três domínios extracelulares do tipo III de fibronectina, um motivo WSXWS conservado e ligações dissulfeto que estabilizam sua estrutura, conforme suportado pela palavra-chave de estrutura 3D.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e formação de ligações dissulfeto, que são críticas para o correto dobramento e ligação ao ligante.
• Variantes genéticas no CSF2RA estão associadas a fenótipos de doença, incluindo proteinose alveolar pulmonar, conforme indicado pela palavra-chave de variante de doença.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio que abrange os aminoácidos 23–320 do domínio extracelular garante o reconhecimento do CD116 nativo na superfície celular, tornando o anticorpo adequado para citometria de fluxo sem permeabilização.
• Titular o anticorpo para determinar a concentração ótima de coloração para o seu tipo celular específico, uma vez que a expressão de CD116 varia entre as linhagens hematopoiéticas.
• Incluir controles apropriados: controle de isotipo, controle de fluorescência-menos-um (FMO) e linhagens celulares com expressão conhecida de CD116 (por exemplo, TF-1 ou U937) para validar a especificidade.
• Considerar que diferenças de glicosilação entre isoformas podem afetar a acessibilidade do epítopo ou a intensidade de fluorescência; verificar o desempenho na matriz de amostra relevante.
• Ao adaptar para outras aplicações, revalide minuciosamente, pois o conjugado pode influenciar as propriedades de ligação bioquímica em comparação com o anticorpo não conjugado.

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