Anticorpo Monoclonal Anti-Humano CD15/SSEA-1 para Citometria de Fluxo - P22083

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD15/SSEA-1 (FUT4)

• A proteína codificada pelo FUT4 (ID do gene 2526) é a Alfa-(1,3)-fucosiltransferase 4, uma glicosiltransferase responsável pela etapa final de fucosilação que cria o antígeno carboidrato Lewis X (CD15/SSEA-1) em glicoproteínas N‑ e O‑ligadas. Referências relacionadas: PMID:1702034 PMID:1716630 PMID:29593094

• A FUT4 transfere fucose do GDP‑β‑L‑fucose para a N‑acetilglicosamina distal das cadeias de lactosamina do tipo‑2 (Galβ1‑4GlcNAc), com maior eficiência em aceptores não sialilados, gerando assim o epítopo Lewis X. Referências relacionadas: PMID:1716630 PMID:29593094

• Em certos tipos de células, a FUT4 também pode fucosilar um resíduo interno de GlcNAc para produzir o antígeno VIM‑2, um ligante para a E‑seletina (SELE). Referências relacionadas: PMID:11278338 PMID:1716630

• Juntamente com a FUT7, a FUT4 contribui para a biossíntese de ligantes de selectina (Lewis X sialilado e Lewis X sialilado 6‑sulfo) que medeiam o rolamento de leucócitos e a homing para locais de inflamação.

• A FUT4 é uma proteína transmembrana que reside na membrana da pilha de Golgi, onde encontra seus substratos glicoproteicos durante o trânsito pela via secretora.

• A expressão foi detetada em células estaminais mesenquimais derivadas da medula óssea, promielócitos imaturos de sangue de cordão umbilical e em populações mieloides e linfoides de sangue periférico.

• A proteína contém sítios de iniciação alternativos e é ela própria N‑glicosilada; pertence à família de glicosiltransferases 10 e contém uma sequência de âncora de sinal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético derivado de CD15/SSEA-1 humano; considere que o anticorpo pode reconhecer um epítopo linear que imita a estrutura carboidrato nativa ou uma espinha peptídica da glicoproteína transportadora.
• Para citometria de fluxo, inclua controlos de isótipo apropriados e verifique a reatividade numa linha celular CD15‑positiva (por exemplo, HL‑60) e numa linha CD15‑negativa (por exemplo, K562).
• Para aplicações de imunofenotipagem, titule o anticorpo para determinar a concentração ótima para a sua população celular específica e protocolo de coloração.
• O peso molecular previsto da enzima alvo é de ~59 kDa; em western blotting (se tentado) esteja ciente de que o anticorpo pode detetar tanto a proteína FUT4 glicosilada como os seus produtos glicoproteicos que contêm CD15.

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